酸性磷酸酶染色液(硝酸铅法)
产品简介:
酸性磷酸酶染色液以β-甘油磷酸钠为底物,在酸性pH下被酸性磷酸酶水解释放出磷酸盐,遇铅离子则生成磷酸铅沉淀,再被S2+置换,最终生成硫化铅棕黑色沉淀。冰冻切片和石蜡切片均可,但多用冰冻切片。临床上,该染色法对前列腺癌和其他脏器的转移性前列腺癌呈强阳性反应,霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、乳腺癌、舌表皮性癌、多核巨细胞瘤的瘤细胞质也呈强阳性反应,Ewing肉瘤、成骨肉瘤等呈阴性反应。
产品组成:
编号 名称 |
D2816 2×50ml |
Storage |
试剂(A):ACP孵育液 |
50ml |
4℃避光 |
试剂(B):ACP硫化液 |
2×1ml |
RT避光 |
试剂(C):ACP对照液 |
10ml |
4℃避光 |
使用说明书 |
1份 |
操作步骤(仅供参考):
(一)冰冻切片染色
1、冰冻切片至蒸馏水。
2、切片入ACP孵育液,置于37℃温箱浸染。
3、入37℃蒸馏水中洗,以去除未被吸附的铅。
4、在上述过程中配制ACP硫化工作液,即取试剂(B)用蒸馏水稀释50倍, 即为ACP硫化 工作液,即配即用。切片入硫化工作液,孵育1~2min。
5、流水冲洗,蒸馏水洗。
6、(可选)核固红复染细胞核,蒸馏水洗。甘油明胶封片。
(二)石蜡切片染色
1、石蜡切片脱蜡至蒸馏水。 切片入ACP孵育液,置于37℃温箱浸染。
2、入37℃蒸馏水中洗2次,每次1min,以去除未被吸附的铅。
3、在上述过程中配制ACP硫化工作液,即取试剂(B)用蒸馏水稀释50倍, 即为ACP硫化 工作液,即配即用。切片入硫化工作液孵育。
4、流水冲洗,蒸馏水洗。
5、(可选)核固红复染细胞核,蒸馏水洗。
6、石蜡切片脱水,常规透明,中性树胶封片。
染色结果:
酶活性部位 |
黑色硫化钴沉淀 |
细胞核 |
根据复染液不同而不同 |
注意事项:
1、ACP孵育液、ACP硫化液易失效,最好分成小分储存。ACP硫化液具有腐蚀性。
2、对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。
3、样本需新鲜,取材后应立即处理,否则会影响酶的活性。
4、不纯的二甲苯会分解黑色沉淀,宜选用AR级以上的二甲苯
有效期:6个月有效。
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