糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法)
产品简介:
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。PAS技术是唯一可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要准确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步骤。大多数情况下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解,形成水溶性的双糖-麦芽糖,在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段,但是出于安全以及缺乏标准唾液的考虑,不主张应用唾液。
NobleRyder糖原D-PAS染色液的特点在于糖原PAS染色之前经淀粉酶处理,糖原消化时需要两张相同的切片,脱蜡后一张切片用含有淀粉酶的适当缓冲液处理,另一张仅用缓冲液处理。然后两张切片均用PAS法染色,消化后染色消失表明存在糖原。
产品组成:
编号 名称 |
D7809 5×50ml |
D7809 5×100ml |
Storage |
试剂(A): 淀粉酶溶液 |
50ml |
100ml |
4℃ |
试剂(B): 过碘酸溶液 |
50ml |
100ml |
4℃ 避光 |
试剂(C): Schiff Reagent |
50ml |
100ml |
4℃ 避光 |
试剂(D): Mayer苏木素染色液 |
50ml |
100ml |
4℃ 避光 |
试剂(E): 酸性乙醇分化液 |
50ml |
100ml |
RT |
使用说明书 |
1份 |
自备材料:
1、蒸馏水
2、系列乙醇
操作步骤(仅供参考):
1、两张相同切片,二甲苯脱蜡,梯度乙醇入水。
2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。另一张不用淀粉酶溶液处理,入水中1h作为对照。
3、流水冲洗两张切片各5~10min。
4、入过碘酸溶液,室温放置5~8min,一般不宜超过10min。
5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。
6、入Schiff Reagent,置于室温阴暗处浸染10~20min。
7、自来水冲洗10min。
染色结果:
糖原、中性,唾液黏蛋白 |
红紫色 |
各种糖蛋白 |
红紫色 |
细胞核 |
蓝色 |
未处理的切片,糖原呈亮红色或红紫色;淀粉酶处理的切片,糖原阴性。 |
注意事项:
1、 切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。
2、 过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时温度以18~22℃最佳。
3、 试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)、应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气,使用前最好提前取出恢复到在室温后,避光暗处使用。
有效期: 6个月有效。