姬姆萨染色液(10×Giemsa Stain)

产品简介：

姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成，Giemsa染色原理和结果与瑞氏染色基本相同，姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳，故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。NobleRyder Giemsa Stain以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料，含NobleRyder特有衬染剂，经研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果，经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。

NobleRyder Giemsa Stain(10×)由10×储存液和10×磷酸盐缓冲液组成，按1:1:8混合成工作液后使用；亦可以分开使用，即先用Giemsa Stain染色液染色，再经磷酸盐缓冲液处理，亦可以得到满意的染色效果。

 产品组成：

编号 名称	D8403 2×100ml	D8403 2×500ml	Storage
试剂(A): Giemsa Stain (10×)	100ml	500ml	RT避光
试剂(B): 磷酸盐缓冲液(10×)	100ml	500ml	RT
使用说明书	1份

 

自备材料：

1.载玻片

2.蒸馏水

3.甲醇

4.显微镜

5.0.1～0.5%乙酸

 

操作步骤(仅供参考)：

(一)一步法涂片染色

Giemsa工作液的配制：

按试剂(A):试剂(B):蒸馏水=1:1:8混合，即取1份Giemsa Stain(10×)、1份磷酸盐缓冲液(10×)、8份蒸馏水，充分混匀，即为Giemsa工作液。Giemsa工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。

常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定1～3min。

将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加Giemsa工作液覆盖涂片，室温滴染15～30min。

用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。

干燥、镜检。

染色结果：

嗜酸性颗粒	粉红色
嗜碱性颗粒	紫蓝色
中性颗粒	淡紫色

(二)两步法涂片染色

1、 Giemsa工作液的配制：

按试剂(A):蒸馏水=1:4配制Giemsa工作液，即取1份Giemsa Stain (10×)加入到4份蒸馏水中充分混匀，即为Giemsa工作液。Giemsa工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。

2、 磷酸盐工作液的配制：

 按试剂(B):蒸馏水=1:4配制磷酸盐工作液，即取1份磷酸盐缓冲液(10×)加入到4份蒸馏水中充分混匀，即为磷酸盐工作液。

3、 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定1～3min。

4、 将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加Giemsa工作液覆盖涂片，室温滴染10～15min。

5、 加入等量磷酸盐工作液，轻轻晃动载玻片，室温静置5～10min。

6、 用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。

7、 干燥、镜检。

染色结果：

嗜酸性颗粒	粉红色
嗜碱性颗粒	紫蓝色
中性颗粒	淡紫色

(三)组织切片染色

1、 Giemsa工作液的配制：

按试剂(A):试剂(B):蒸馏水=1:1:8配制，即取1份Giemsa Stain(10×)、1份磷酸盐缓冲液(10×)、8份蒸馏水，充分混匀，即为Giemsa工作液。Giemsa工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。

2、新鲜组织立即置于Regaud固定液固定2天，期间应更换1次固定液。

3、3%重铬酸钾固定1天。

4、流水冲洗16个小时或过夜。

5、照常规脱水、包埋。

6、切片厚度约为5μm，常规脱蜡至水。

8、蒸馏水清洗2次，每次1min。

9、入含Giemsa工作液染缸，浸染18～24h。

10、蒸馏水稍微清洗。

 

染色结果：

细胞核	蓝色至紫色
细胞质	淡蓝色
嗜铬细胞胞质	黄绿色
结缔组织	淡红色

 

注意事项：

1.血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色效果。

2.涂片染色中Giemsa染色后，请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。

3.如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液浓度。

4.涂片染色和组织切片染色中，pH值对染色有一定影响，载玻片应清洁、无酸碱污染，以免影响染色效果。

5.染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用，否则染色液可能失效。

6.组织切片染色中，染色后需用大量0.1～0.5%乙酸急速冲洗，避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。

7.0.5%乙酸分化常用于Giemsa组织切片染色，如有必要亦可用于细胞涂片，但其浓度应适量下调。0.5%乙酸分化切片时，切片呈粉红色即可终止。

8.Giemsa组织切片染色中，无水乙醇脱水要迅速，否则切片易褪色。

 

有效期： 24个月有效。