巴比妥缓冲液(5×,pH7.4)

产品简介：

巴比妥(Barbital)商品名为佛罗拿(Veronal)，又称巴比通(Barbitone)，是一种长效类催眠剂，具有镇静、催眠、抗惊厥及抗癫痫等作用。分子式为C12H12N2O3，分子量为232.24，微溶于水，溶于热水和乙醇，易溶于碱性溶液。

NobleRyder巴比妥缓冲液(5×,pH7.4)主要由巴比妥、巴比妥钠、氯化钠等组成，pH值为7.4，常用于血清总补体活性(CH50)测定中制备绵羊红细胞悬液，亦可以用于制备致敏性绵羊红细胞等。该试剂为5×储存液，临用前稀释至1×。

产品组成：

自备材料：

1、绵羊血

2、抗凝剂

3、离心机

4、分光光度计

5、溶血素

6、水浴锅或温箱

操作步骤(仅供参考)：

1、 巴比妥缓冲工作液的配制：临用前，按巴比妥缓冲液(5×,pH7.4)：蒸馏水或去离子水=4:1稀释，即取1份巴比妥缓冲液(5×,pH7.4)和4份蒸馏水或去离子水充分混合，即为巴比妥缓冲工作液，也就是1×巴比妥缓冲液。

2、绵羊红细胞的制备

⑴ 取绵羊颈静脉血，立即加入等量的抗凝剂，充分混匀，4℃保存，2～3周内有效。

⑵ 加入适量的1×巴比妥缓冲液，2500g离心5min，弃上清。

⑶ 重复步骤(2)2次，以便清洗干净。

⑷ 取2ml上述绵羊红细胞溶液，加入98ml 1×巴比妥缓冲液，配制成2%的绵羊红细胞悬液。

⑸ 为了使2%的绵羊红细胞悬液标准化，一般吸取0.2ml 2%的绵羊红细胞悬液加入5ml 1×巴比妥缓冲液，用分光光度计测定A542nm处吸光值，以后每次试验均参照该值校正绵羊红细胞的浓度。

3、 致敏绵羊红细胞的制备

⑴ 用1×巴比妥缓冲液将已知效价的溶血素稀释至2单位。

⑵ 取上述2单位的溶血素、2%的绵羊红细胞悬液等量混合。

⑶ 37℃孵育20min，并每隔几分钟振摇一次，使绵羊红细胞致敏。

注意事项：

1、制备细胞悬液时应根据实验具体需要操作。

2、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。

3、稀释成1×巴比妥缓冲液，应尽量在24h内使用。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 6个月有效。