DMEM/F-12 培养基是将 DMEM 与 Ham's F-12 培养基以 1：1 比例混合改良而来的。改良得到的 DMEM/F-12 培养基，营养成分更为丰富，含有更多种微量元素，广泛应用于多种哺乳类细胞的培养，也适用于于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养。已在 DMEM/F-12 之中成功培养的细胞包括 MDCK、胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞及小鼠成纤维细胞。
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