对BD Horizon™ Fixable Viability Stain 620染色的人Jurkat细胞进行流式细胞分析。将来自人 Jurkat（急性 T 细胞白血病，ATCC TIB-152）细胞系的细胞用 0.025% DMSO（左图）或 5 μM 喜树碱（右图）处理 16 小时，然后用 BD Horizon™ Fixable Viability Stain 620 （Cat.No.564996）在无血清缓冲液中。然后将细胞保持不固定状态（实线直方图）或固定在BD Cytofix™固定缓冲液（Cat.No. 554655） 并在 BD Phosflow™ 烫发/洗涤缓冲液 I 中透化（Cat.编号 557885）（虚线直方图）。直方图来自具有 Jurkat 细胞前向和侧向光散射特征的门控事件。使用BD LSRFortessa™流式细胞术系统进行流式细胞术分析。请注意，FVS620还与BD Phosflow™ Perm Buffer III（Cat.No.558050）或BD Pharmingen™转录因子缓冲液套装（货号。编号 562574/562725）。Fixable Viability Stain 620 已在小鼠身上进行了测试（数据未显示）。
制备
将FVS620染料粉末和230μl新鲜细胞培养级二甲基亚砜（DMSO;例如，Sigma D2650）置于室温。加入230μlDMSO并涡旋溶液。检查溶液并重复涡旋，直到储备染料完全溶解。这是库存解决方案。
存储
到达后，将干燥并避光的干燥染料存放在 -80°C 直至使用。用DMSO复溶后，将储备溶液以小等分试样储存在-20°C下。储存 90 天后不要使用复溶染料。请在用DMSO复溶后90天后丢弃染料溶液。
流式细胞术要求
可以使用配备黄绿色或蓝色激光的流式细胞仪（例如，BD FACSCanto™ II、BD LSRFortessa™、BD LSR™ II或BD Accuri™ C6）。该染料可以从BD Horizon™ PE-CF594（例如，610/20-nm滤光片）或PerCP-Cy™5.5（例如，695/40-nm滤光片）的滤光片中读取。荧光补偿最好使用目标细胞的染色和未染色样品来实现。