产品说明:
BD Horizon™ Fixable Viability Stain 450 (FVS450) 可用于在多色流式细胞术应用中区分活细胞和非活哺乳动物细胞。这种紫色荧光染色剂含有一种与细胞表面和细胞内胺反应并共价结合的染料。与非渗透性活细胞相比,可渗透性质细胞膜(例如存在于坏死细胞中的膜)允许紫色染料在细胞内扩散并与更高总浓度的胺共价结合。因此,存在于典型体外测定标记物中的坏死细胞 具有更高水平的染料,其荧光强度比活细胞的荧光强度高 10-20 倍。标记的细胞可以用甲醛固定,用于下游去污、冷冻和/或透化以及随后的细胞内染色,同时保持稳定的 FVS450 荧光。
推荐的实验流程
制备
带来 FVS450 染料粉末和 400 μl 新鲜细胞培养级二甲基亚砜 (DMSO;例如。Sigma D2650) 的 S S D2650) 的 S 的 S Tim加入 400 μl DMSO 并充分涡旋溶液。检查溶液并重复涡旋,直到染料储备液完全溶解。
存储
到达后,将干燥染料储存在 -80°C 直至使用。用 DMSO 重构后,将溶液储存在 -20°C。 染料溶液最多可用于四个冻融循环。当较小的实验需要时,可以制备等分试样(例如,~100 μl 等分试样)并将其储存在 -20°C 下。储存 40 天后请勿使用重构染料。用 DMSO 重构后 40 天后,请丢弃染料溶液。
细胞术要求
可以使用配备紫色激光的流式细胞仪(例如,BD FACSCanto™ II、BD LSRFortessa™ 或 BD™ LSR II)。最好使用BD™ CompBeads抗小鼠Ig、κ/阴性对照(FBS)补偿颗粒组(货号.编号 552843) 用 BD Horizon™ V450 小鼠抗人 CD3、CD4 或 CD19 抗体染色。或者,BD™ CompBeads 抗大鼠 Ig、κ/阴性对照 (FBS) 补偿颗粒套装(货号.552844号)可以用BD Horizon™ V450大鼠抗小鼠CD3、CD4或CD19抗体染色。
BD Horizon™ Fixable Viability Stain 450 (FVS450) 可用于在多色流式细胞术应用中区分活细胞和非活哺乳动物细胞。这种紫色荧光染色剂含有一种与细胞表面和细胞内胺反应并共价结合的染料。与非渗透性活细胞相比,可渗透性质细胞膜(例如存在于坏死细胞中的膜)允许紫色染料在细胞内扩散并与更高总浓度的胺共价结合。因此,存在于典型体外测定标记物中的坏死细胞 具有更高水平的染料,其荧光强度比活细胞的荧光强度高 10-20 倍。标记的细胞可以用甲醛固定,用于下游去污、冷冻和/或透化以及随后的细胞内染色,同时保持稳定的 FVS450 荧光。
推荐的实验流程
制备
带来 FVS450 染料粉末和 400 μl 新鲜细胞培养级二甲基亚砜 (DMSO;例如。Sigma D2650) 的 S S D2650) 的 S 的 S Tim加入 400 μl DMSO 并充分涡旋溶液。检查溶液并重复涡旋,直到染料储备液完全溶解。
存储
到达后,将干燥染料储存在 -80°C 直至使用。用 DMSO 重构后,将溶液储存在 -20°C。 染料溶液最多可用于四个冻融循环。当较小的实验需要时,可以制备等分试样(例如,~100 μl 等分试样)并将其储存在 -20°C 下。储存 40 天后请勿使用重构染料。用 DMSO 重构后 40 天后,请丢弃染料溶液。
细胞术要求
可以使用配备紫色激光的流式细胞仪(例如,BD FACSCanto™ II、BD LSRFortessa™ 或 BD™ LSR II)。最好使用BD™ CompBeads抗小鼠Ig、κ/阴性对照(FBS)补偿颗粒组(货号.编号 552843) 用 BD Horizon™ V450 小鼠抗人 CD3、CD4 或 CD19 抗体染色。或者,BD™ CompBeads 抗大鼠 Ig、κ/阴性对照 (FBS) 补偿颗粒套装(货号.552844号)可以用BD Horizon™ V450大鼠抗小鼠CD3、CD4或CD19抗体染色。