产品说明:
形式:结晶粉末
储存条件:室温下干燥
技术:
细胞培养 |哺乳动物:适合
竞争性抑制 ELISA:适合
杂质:内毒素和总需氧微生物计数,测试
颜色:白
有效pH范围:6.8-8.2
pKa (25 °C):7.5
一般描述
HEPES缓冲液不会对细胞产生细胞毒性作用,因此可用于动物细胞培养。
HEPES被视为可用于生物研究的最佳通用缓冲液之一。在生理pH下,该分子是两性离子的,并在pH 6.8至8.2下可有效作为缓冲剂。 HEPES已用于一系列应用,包括组织培养。 它常用于在空气中对细胞培养基进行缓冲。 HEPES 在 Mg 的体外实验中表现出了应用潜力。
HEPES,即 4-(2-羟乙基)哌嗪-1-乙烷磺酸,是一种两性离子N-取代氨基磺酸缓冲液。 在 pH 为 6.8 ~ 8.2 的范围内表现出优异的缓冲能力,25°C 时 pKa 为 7.48。 HEPES 被广泛认为是最通用的缓冲液之一,广泛应用于细胞生物学、生化和生物学研究。 它的一个显著特性是不与金属离子反应。 与许多缓冲液不同,HEPES 不会与大多数金属形成明显的配合物,这使得它适用于涉及金属离子的应用,且不影响其活性。 这个特性增强了它作为“非协调缓冲区”的效用。 在细胞培养中,即使在细胞呼吸引起的二氧化碳浓度波动中,HEPES 也能保持稳定的生理 pH 值。 这使它有别于碳酸氢盐缓冲液 (NaHCO3),后者虽然很常用,但在 pH 稳定性方面效果较差。
HEPES 在各种生物和生化过程中也被证明很有用。 它的两性性使它适合作为在等电聚焦中产生 pH 梯度的分离器,这是一种经常用于蛋白质分离和分析的技术。 此外,与三磷酸腺苷等取代胺基较少的缓冲液相比,HEPES 对 DNA 限制性内切酶反应的干扰最小。 这使得它成为涉及 DNA 操作和分析的应用的首选技术。 除了这些特定的应用之外,HEPES 在许多其他生物和生化过程中也很有价值,包括免疫沉淀、细胞裂解和活细胞成像。 HEPES 的多功能性,加上卓越的 pH 缓冲能力和与其他分子的最小相互作用,使其成为各种研究领域不可或缺的工具。
应用
HEPES可用于:
对 Dulbecco′s modified Eagle′s medium(DMEM)培养基进行补充以培养和维持细胞系
作为血小板悬浮缓冲液的一种组分
对Hank碱性盐溶液进行补充以用于洗涤胰腺组织
作为在酶联免疫吸附测定(ELISA)中蛋白纯化和定量的洗涤缓冲液和封闭缓冲液中一种组分
生物学溶液的pH调整和维持
作为Hank平衡盐溶液(HBSS)和解离培养基中的一种组分用于研究神经发育
用于组织匀浆以及来自细胞的溶质和核提取物的制备
作为角质形成细胞和成纤维细胞培养基的一种组分
特点和优势
经过测试,确认低水平的重金属污染,确保各种应用的适用性
25°C 时,极易溶于水,pH 值范围为6.8 - 8.2,pKa 为 7.5
金属离子结合可忽略
与三磷酸腺苷和磷酸盐等其他缓冲剂相比,对细胞的毒性较小
在宽 pH 范围内稳定
经过测试,确定内毒素和总需氧微生物计数
不含 DNase, NICKase、RNase、内切酶、外切酶和蛋白酶