产品说明：

浓度：0.25%

应用细胞培养|哺乳动物：合适

猪细小病毒杂质，未检出（9 CFR）

pH值7.0-7.6

储存温度。−20摄氏度

Sigma-AldrichT40490.25%yi蛋白酶-EDTA 溶液100ml, 0.25%Trypsin-EDTA solution,产品说明：

0.25%, sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 2.5 g porcine trypsin and 0.2 g EDTA • 4Na per liter of Hanks′ Balanced Salt Solution with phenol red

0.25%，无菌过滤，生物制剂，适合细胞培养，每升含酚红的汉克斯平衡盐yan溶液含2.5 g猪yi蛋白酶和0.2 g EDTA•4Na

yi蛋白酶-EDTA溶液已用于：

在高浓度样品的相对细胞频率测定期间，将在补充了10%胎牛血清的RPMI 1640中培养的HT29人结直肠癌细胞进行分离。

yi蛋白酶消化瞬时转染的人胚肾tcA-201细胞系

在细胞培养期间酶促释放粘附于支架的小鼠成纤维细胞（L929细胞系），以评估几种改性处理对聚（L/D）bing交酯96/4非织造支架和纤维的影响。

该产品的常见用途在于将贴壁细胞从培养基表面移除。 将细胞从基底上分离所需的yi蛋白酶浓度主要依赖于细胞类型和培养基已使用的时间   

Biochem/physiol Actions

yi蛋白酶可切割赖氨酸和精an酸残基的C末端肽段。 如果酸性残基位于切割位点的任意一侧，则该反应的水解速度减慢，并且如果脯an酸残基位于切割位点的羧基侧，则水解停止。 yi蛋白酶活性的最佳pH条件为7-9。 yi蛋白酶还可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键。 将EDTA添加到yi蛋白酶溶液中作为螯合剂，用于中和钙离子和镁离子以防止其抑制yi蛋白酶活性。 去除这些离子会增加酶活性。

丝an酸蛋白酶抑制剂（包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑tai酶等）会抑制yi蛋白酶。

Components

yi蛋白酶是由223个氨基酸残基的单链多肽所组成，通过从yi蛋白酶原在Lys - lle肽键处被切割去除N末端六肽而产生。 氨基酸序列通过6个二硫键交联。 这是天然形式的yi蛋白酶——β-yi蛋白酶。 β-yi蛋白酶可以自溶，在Lys-Ser残基处断裂，产生α-yi蛋白酶。 yi蛋白酶是丝an酸蛋白酶家族的成员。

Caution

本品应置于-10至-40°C环境冷冻储存。避免反复冻融。

Preparation Note

该产品中含有酚红。 由于该产品通过干冰进行运输，所以在包装中会有显著的二氧化碳累积。 这些CO2可能会进入到溶液并略微降低pH，从而产生橙色而非淡粉色的颜色。 这种橙色的溶液依然适合使用，或者也可利用氢氧化钠对pH进行调整。 用过高浓度的yi蛋白酶对细胞进行过长时间的孵育可造成细胞膜的损伤并杀死细胞。 将yi蛋白酶溶解或将其从浓缩液进行稀释应采用不含有Ca2+或Mg2+的缓冲盐溶液。

性质

相关类别分析和工业酶，应用指数，细胞解离，细胞解离（细胞培养测试），细胞解离酶，