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用FAM-FLISP丝an酸蛋白酶试验检测活性丝an酸蛋白酶。该体外分析采用绿色荧光标记羧荧光素（FAM），其与目标an基酸苯丙氨an酸相连，并使用氯甲基酮（CMK）反应基团，形成荧光抑制剂探针FAM Phe CMK。FAM-FLISP标记活细胞中活性mi蛋白酶样丝an酸蛋白酶。使用荧光显微镜、荧光平板阅读器或流式细胞仪分析样品

丝an酸蛋白酶是一类蛋白水解酶，其定义是在酶的活性中心存在丝an酸残基。激活的丝an酸蛋白酶在几个不同的功能中发挥着重要作用，包括：细胞凋亡、肿瘤恶性标志物、乳腺癌和头颈癌的诊断和预后指标。丝an酸蛋白酶活性在与移植排斥和感染相关的多种其他细胞介导疾病中也发生改变。这类酶中 zui ju 特征的是yi蛋白酶和mi蛋白酶。所有活细胞都有一个基本水平的mi蛋白酶样酶活性，这将随着细胞的生理状态以及细胞类型而变化。由于丝an酸蛋白酶在凋亡过程中起支持作用，因此，与相同细胞类型的健康细胞相比，凋亡细胞群体中的丝an酸蛋白酶活性更高。半胱天冬酶的激活是上游的，可能是丝an酸蛋白酶激活的先决条件。FLISP可与FLICA结合使用，以区分同一细胞中的丝an酸蛋白酶活性和半胱天冬酶活性。

FLISP试剂FAM-Phe-CMK进入每个细胞并与激活的mi蛋白酶样丝an酸蛋白酶结合。由于FAM-Phe-CMK-FLISP试剂与活性酶共价偶联，因此它保留在细胞内，而任何未结合的FAM-Phe-CMK-FLISP试剂扩散出细胞并被冲走。剩余的绿色荧光信号直接测量添加试剂时细胞中存在的活性mi蛋白酶样丝an酸蛋白酶活性。含有结合FLISP的细胞可通过荧光平板读取器、荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。用FLISP试剂标记的细胞可立即读取或使用试剂盒中的固定剂保存16小时。样品也可使用碘化丙啶或Hoechst 33342（也包括在试剂盒中）进行分析，以分别检测坏死或核形态的变化。