Caspase 2活性检测试剂盒(比色法)
产品简介:
Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)家族在介导细胞凋亡过程的起着极其重要的作用,其成员包括Caspase1~11等,均属于蛋白酶家族。Caspase 2又称Ich-1、Nedd-2或caspase-2,在细胞凋亡信号转导过程中被激活。Caspase 2 mRNA具有两种不同长度的剪切体,其全长mRNA翻译的蛋白可促进凋亡,而短蛋白产物则可抑制凋亡。Caspase 2可以被Caspase 1、3和granzyme B激活。
NobleRyder Caspase 2活性检测试剂盒(比色法) (Caspase 2 Colorimetric Assay Kit) 的检测原理是利用Caspase 2催化底物acetyl-Val-Asp-Gln-Gln-Asp p-nitroanilide (Ac-VDQQD-pNA)产生黄色的游离硝基苯胺pNA(p-nitroaniline),通过分光光度比色法测定pNA在400~410nm处吸光值,从而间接获得caspase 2的活性。
产品组成:
编号 名称 |
C4906 50T |
C4906 100T |
Storage |
试剂(A): Caspase Lysis buffer |
10ml |
20ml |
4℃ |
试剂(B): Assay buffer |
10ml |
20ml |
4℃ |
试剂(C): Ac-VDQQD-pNA(2mM) |
0.25ml×2 |
0.25ml×4 |
-20℃ 避光 |
试剂(D): pNA(10mM) |
0.25ml×2 |
0.25ml×4 |
-20℃ 避光 |
使用说明书 |
1份 |
自备材料:
1.水浴锅或恒温箱
2.96孔板
3.酶标仪或分光光度计
|
空白对照 |
高酶活性样品 |
低酶活性样品 |
Assay buffer |
90μl |
85μl |
65μl |
待测样品 |
0μl |
5μl |
25μl |
Ac-VDQQD-pNA(2mM) |
10μl |
10μl |
10μl |
总体积 |
100μl |
100μl |
100μl |
注意事项:
1.建议每次测定时都做标准曲线,以使标准更准确,另外标准品需避免反复冻融。
2.如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但应考虑根据比色杯的最小检测体积,尽量采用100μl体积以内的比色杯。
3.所测样本的值高于标准曲线的上限,应用裂解液稀释样品后重新测定。
4.样品蛋白有效含量过低或Caspase激活水平过低都会导致实际测得的A405过低,应注意使蛋白浓度尽量达到1~3μg/ml,调整诱导凋亡的时间和条件。
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。