Thermo Scientific SuperSignal West Pico比GE ECL底物更灵敏。经连续稀释（50-0.003ng）的重组小鼠IL-2蛋白经电泳后转移至硝化纤维素膜上，封闭并使用1μg/ml大鼠抗小鼠IL-2抗体稀释液孵育。洗膜后，使用20ng/ml稀释的辣根过氧化物酶标记的山羊抗大鼠二抗孵育。再次洗膜，之后与按操作手册准备好的底物进行孵育。印迹分别曝光1分钟和5分钟。
这种SuperSignal底物系统产生更长时间的发射光，并且在保持灵敏度的同时具有其他入门级的基于鲁米诺发光系统至少两倍的强度。而所有这些只需同类产品的三分之二的价格。
产品特点：
- 经济-相对其他具有相似灵敏度的化学发光底物，每毫升底物花费得更少。
- 皮克级的灵敏度-高灵敏度用于宽蛋白水平范围快速发展
- 更长的发光时间-一个工作日内可持续发出强光，可多次曝光
- 高强度-信号强度是其他基于鲁米诺系统的两倍
- 出色的稳定性-工作液可稳定24小时；试剂盒在室温至少稳定一年
- 节省抗体-一抗和二抗的稀释度更高
增强的发光动力学：Thermo Scientific SuperSignal底物vs.GE ECL系统。孵育六个小时之后SuperSignal West Pico底物净相对强度远高于GE ECL系统。
参考文献：
Butchbach, M., et al. (2004). J. Biol. Chem.279, 34388-34396.
Ju, T., et al. (2002). J. Biol. Chem.277, 178-186.
Kagan, A., et al. (2000). J. Biol. Chem.275, 11241-11248.
Messenger, M.M., et al. (2002). J. Biol. Chem.277, 23054-23064.
Sorci, G., et al. (2003). Mol. Cell. Biol.23, 4870-4881.
订购信息：
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产品货号
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产品名称
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包装
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34078
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SuperSignal West Pico化学发光底物§
足够用于10000cm2印迹的底物
包括：鲁米诺/增强试剂
稳定的过氧化物缓冲液
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1L
500ml
500ml
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34080
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SuperSignal West Pico底物
足够用于5000cm2印迹的底物
包括：鲁米诺/增强试剂
稳定的过氧化物缓冲液
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500ml
250ml
250ml
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34077
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SuperSignal West Pico底物
足够用于1000cm2印迹的底物
包括：鲁米诺/增强试剂
稳定的过氧化物缓冲液
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100ml
50ml
50ml
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34079
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SuperSignal West Pico底物试用装
足够用于500cm2印迹的底物
包括：鲁米诺/增强试剂
稳定的过氧化物缓冲液
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50ml
25ml
25ml
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标准检测试剂盒
• 辣根过氧化物酶标记的二抗
• SuperSignal West Pico底物（500ml）
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产品货号
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产品名称
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包装
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34082
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SuperSignal West Pico小鼠
IgG检测试剂盒
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试剂盒
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34083
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SuperSignal West Pico兔
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试剂盒
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完全检测试剂盒
• 辣根过氧化物酶标记的二抗
• SuperBlock封闭缓冲液（1L）
• Tris缓冲盐溶液（TBS），4包（每包500ml）
• SuperSignal West Pico底物（500ml）
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产品货号
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产品名称
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包装
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34081
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SuperSignal West Pico完全
小鼠IgG检测试剂盒
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试剂盒
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34084
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SuperSignal West Pico完全
兔IgG检测试剂盒
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试剂盒
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当底物发生化学反应而产生的能量以光的形式释放出来的时候，我们称这个过程为化学发光。鲁米诺（luminol）是最常用的化学发光试剂之一，被过氧化物氧化后它会产生一种激发态的产物——aminophthalate。这种产物衰变至低能态的同时释放出光子。专利添加物可以提高鲁米诺反应的发光强度和持续时间（稳定性），从而使增强型化学发光（ECL）成为可能。
化学发光底物被广泛使用是因为其具有其他检测方法不具备的优点，这些优点使得化学发光成为大多数蛋白实验室首选的检测方法。使用化学发光可以通过多次曝光获得最好的成像结果。还可以将检测试剂完全去除，再对其他目的蛋白进行检测并成像，或对检测条件进行优化。具有很宽的线性响应范围，从而可以检测并定量很宽浓度范围的蛋白质。最重要的是，化学发光在所有的检测方法中具有最高的灵敏度。使用辣根过氧化物酶标记的抗体和Thermo ScientificSuperSignal West Femto Chemiluminescent Substrate(Product # 34095)，可以检测的下限为1飞克，而这得益于这种底物中的增强剂可以很大程度地增强发光强度并增加发光持续时间。
化学发光底物与其他底物不同之处在于只有在酶和底物发生反应的时候才会产生瞬时的可被检测的光。这与那些可产生稳定有颜色产物的底物不同；些有颜色的沉淀在酶-底物反应结束之后仍然存在于膜上。在化学发光免疫印迹中，底物是反应限制试剂。一旦其耗尽，光就会逐渐变弱并消失。实验中一定要使用适当稀释浓度的抗体，这样才会在几小时内产生稳定的光信号输出，从而维持蛋白检测的一致性和灵敏度。当抗体没被足够稀释时，永远不会获得稳定的光信号输出。系统中太多的酶会快速氧化底物并终止信号。
化学发光。鲁米诺在HRP和双氧水存在的条件下会被氧化形成激发态的产物（3-aminophthalate）。3-aminophthalate在衰变至基态的过程中会发出波长为425nm的光。
增强型化学发光的优点
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灵敏性
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•强信号，低背景
•只需很少的抗原和抗体
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快速
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•印迹上快速的底物处理
•信号在几秒钟之内产生
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稳定
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•与放射性同位素不同，存放期很长
•4oC储存
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硬拷贝结果
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•用X光胶片捕获结果
•结果不会随时间而褪色，不用担心膜的破裂
•永久保存
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胶片结果
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•信号随曝光时间增强而增强
•可选择在不同时间曝光
•可优化显色的方法
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印迹可重新检测
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•非同位素标记的探针可从膜上洗掉
•可重复进行免疫检测
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宽线性范围
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•可检测很宽范围的蛋白浓度
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可定量
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•可用反射型显象密度计或成像设备
（例如CCD相机）扫描X光胶片
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Thermo Scientific化学发光底物的比较
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Pierce ECL 底物
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SuperSignal West Pico
化学发光底物
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主要优点
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•只需同类竞争ECL底物价格
的一半即可获得同样的信号强度
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•相比同类竞争产品，
更好的信号，更低的价格
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更低的检测极限†
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•低-微克（10-6）
•高-皮摩尔（10-11）
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•低-皮克（10-12）
•中-阿摩尔（10-17）
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信号持续时间
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•30分钟-2小时
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6-8小时
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建议抗体稀释度‡
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一抗：1:100-1:5000
二抗：1:1000-1:15000
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一抗：1:1000-1:5000
二抗：1:20000-1:100000
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室温工作溶液稳定性
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1小时
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24小时
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储液存放时间
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4oC一年
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室温一年
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SuperSignal West Dura
持久性化学发光底物
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SuperSignal West Femto
最高灵敏度化学发光底物
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主要优点
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•可以获得持续的信号，是
用于成像设备的理想产品
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•对HRP检测系统是最灵敏的底物
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更低的检测极限†
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•中-飞克（10-14）
•高-zeptomole（10-19）
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•低-飞克（10-15）
•中-zeptomole（10-20）
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信号持续时间
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24小时
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8小时
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建议抗体稀释度‡
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一抗：1:1000-1:50000
二抗：1:50000-1:250000
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一抗：1:5000-1:100000
二抗：1:100000-1:500000
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室温工作溶液稳定性
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24小时
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8小时
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储液存放时间
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室温一年
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4℃一年或室温六个月
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