SIM HF 培养基为澄清淡黄色透明液体,如果一旦发现培养基变得浑浊或出现沉淀,请勿使用。
保存条件
2~8℃避光保存,一旦过期,请勿使用。
稳定性及保质期
室温下一个星期内稳定。
自收到之日起, 2~8℃避光保存,12个月内稳定。
细胞冻存与复苏
细胞冻存:
选择处于对数生长期的细胞,保证活率大于90%。
制备细胞冻存液:45%新鲜培养基,45%条件培养基,10%DMSO。
200g离心5分钟,弃去上清。
用细胞冻存液重悬细胞,取样计数,调整细胞密度;
迅速转移重悬的细胞至无菌的冻存管中,每管1~2ml。
迅速分装细胞至无菌的冻存管中,每管 1~2 mL,密封。
将冻存管放入程序降温盒中,-80℃冰箱放置过夜; 如需要长期保存,在液氮罐中保存。
细胞复苏:
迅速取出冻存的Hi5细胞,在 27℃水浴解冻(可以在水中轻轻晃动,时间控制在 1 min 内);
对冻存管表面消毒;将融化的细胞转至无菌的含 5-10 mL新鲜培养基的无菌离心管中;
200 g 低速离心 5 分钟,缓慢倒掉上部培养基,切勿将沉降的细胞悬起;
用 10-20 mL 新鲜培养基重悬细胞,确保重悬后的细胞密度大于 1×106cells/mL 左右;
将重悬的细胞放入无菌培养瓶中,旋盖拧松,放在摇床中悬浮培养;
当细胞密度生长达到 2~4×106/mL 时,可以进行传代。
保存条件
2~8℃避光保存,一旦过期,请勿使用。
稳定性及保质期
室温下一个星期内稳定。
自收到之日起, 2~8℃避光保存,12个月内稳定。
细胞冻存与复苏
细胞冻存:
选择处于对数生长期的细胞,保证活率大于90%。
制备细胞冻存液:45%新鲜培养基,45%条件培养基,10%DMSO。
200g离心5分钟,弃去上清。
用细胞冻存液重悬细胞,取样计数,调整细胞密度;
迅速转移重悬的细胞至无菌的冻存管中,每管1~2ml。
迅速分装细胞至无菌的冻存管中,每管 1~2 mL,密封。
将冻存管放入程序降温盒中,-80℃冰箱放置过夜; 如需要长期保存,在液氮罐中保存。
细胞复苏:
迅速取出冻存的Hi5细胞,在 27℃水浴解冻(可以在水中轻轻晃动,时间控制在 1 min 内);
对冻存管表面消毒;将融化的细胞转至无菌的含 5-10 mL新鲜培养基的无菌离心管中;
200 g 低速离心 5 分钟,缓慢倒掉上部培养基,切勿将沉降的细胞悬起;
用 10-20 mL 新鲜培养基重悬细胞,确保重悬后的细胞密度大于 1×106cells/mL 左右;
将重悬的细胞放入无菌培养瓶中,旋盖拧松,放在摇床中悬浮培养;
当细胞密度生长达到 2~4×106/mL 时,可以进行传代。