产品说明：

此 FIX&PERM® 细胞固定和透化试剂盒包含 2 种试剂：固定培养基（试剂 A）和透化培养基（试剂 B）。它旨在首先用试剂A固定悬浮细胞，然后用试剂B透化细胞膜。该过程使抗体能够进入细胞内结构，并使细胞的形态散射特征完好无损。特定配方可减少背景染色，并允许同时添加透化培养基和荧光染料标记的抗体。FIX&PERM®适用于使用流式细胞术分析来自各种人类生物样本（血液，骨髓等）的正常和恶性白细胞群。在最终解释之前，结果必须由经过认证的专业人员放在其他诊断测试以及患者的临床病史的背景下。

形式：1 x 5ml小瓶固定培养基（试剂A）和1 x 5ml小瓶透化培养基（试剂B）。

FIX&PERM®试剂设计用于所有市售流式细胞仪。校准和补偿应根据制造商的说明进行。

每批FIX&PERM®批次的质量取决于对来自代表性供体的明确定义的血液样本的固定和透化，随后比较所获得的白细胞的前向和侧向散射特征，以及几种膜质和细胞质抗原的免疫染色效率。

应用

生物体液（血液、骨髓等）必须在无菌条件下收集。建议使用 EDTA 或肝素进行抗凝治疗。样品应在室温下储存直至使用。为了获得最佳结果，应在24小时内处理和分析样品。具有大量非活细胞的样品可能会导致错误的结果，在这种情况下，需要使用例如碘化丙啶测定细胞活力。所有生物样品都必须谨慎处理。始终将它们视为潜在的传染性。使用适当的预防措施，如手套、实验室外套等。

固定、透化和染色程序：

对于每个要分析的样品，在50ml管中加入5μl全血，骨髓或单核细胞悬液

加入100μl试剂A（固定培养基，在室温下储存和使用）

在室温下孵育15分钟

加入 5ml 磷酸盐缓冲盐水，以 5 g 离心细胞 300 分钟

除去上清液并添加到细胞沉淀中100μl试剂B（透化培养基）和20μl适当的Nordic-MUbio单克隆抗体偶联物

低速涡旋1-2秒

在室温下孵育15分钟

如上所述，用磷酸盐缓冲盐水洗涤细胞

去除上清液并将细胞重悬于鞘液中以立即分析或将细胞重悬于0.5ml 1.0%甲醛中，并将其储存在2-8°C的黑暗中。在24小时内分析固定细胞。

评论：特殊情况（稀释的骨髓样本，其他含有低可溶性蛋白质的样本）可能会受益于在FIX&PERM®治疗之前补充血浆成分，以创造一种环境，这更接近于抗凝血中的凝血。为此，建议添加IgG制剂（例如贝利球蛋白P，ZLB Behring，终浓度10mg / ml）和人血清白蛋白（例如人白蛋白“Behring”20% - 输注溶液，最终浓度40mg / ml）。

该技术的局限性：流式细胞术只能由专业用户进行。流式细胞仪校准不当、荧光泄漏到其他通道的补偿不准确以及区域定位不正确可能导致错误的结果。

由于各种原因，红细胞的裂解可能是不可能的。在这种情况下，建议在染色前通过密度梯度离心分离单核细胞（MNC）。

只要所使用的程序尊重技术建议并遵守良好的实验室规范，结果将是正确和可重复的。

FIX&PERM®溶液的浓度允许固定和透化人造血细胞。因此，强烈建议在细胞和抗体的浓度和体积方面坚持工作方案。FIX&PERM®的特性已使用EDTA抗凝外周血测定。

储存

FIX&PERM®细胞固定和透化试剂盒试剂应在室温下储存和使用。不要冻结。试剂的稳定性：请参阅印在小瓶上的有效期。不建议在有效期后使用试剂。如果试剂在指定条件以外的任何条件下储存，则必须由用户验证条件。如果形成沉淀物或发生变色，请勿使用试剂。 如果获得的意外结果不能归因于实验室程序的差异，请与我们联系。

运输条件：在环境温度下运输

注意

本产品仅供研究使用，并用于体外测试，不适用于涉及人类或动物的诊断或治疗程序。仅适用于专业用户。FIX&PERM®细胞固定和透化试剂盒的试剂A含有甲醛，并标有：有害。甲醛有毒、致敏，是可疑的致癌物质。切勿用嘴移液，避免接触眼睛、皮肤和衣服。建议采取适当的处理程序。作为主要规则，18岁以下的人不得使用本产品。必须仔细指导用户正确的工作程序、产品的危险特性和必要的安全说明。有关更多信息，请参阅安全数据表 （SDS）。根据当地法规处理产品残留物。

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