Collagenase, Type 1 Source: Clostridium histolyticum
产品货号：LS004194
产品名称：Collagenase, Type 1 Source: Clostridium histolyticum
产品规格：100 mg
产品简介：
粗胶原酶制剂包含两种不同胶原酶的几种亚型，一种巯基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一种胰蛋白酶样酶和一种氨肽酶。胶原溶解和蛋白水解活性的这种组合可有效分解细胞间基质，这是组织解离的重要组成部分。该复合物的一种成分是一种水解酶，它优先降解天然胶原蛋白中 Y-Gly 键处的 Pro-Y-Gly-Pro 序列中的螺旋区域，其中 Y 通常是中性氨基酸。这种切割产生的产物容易受到进一步的肽酶消化。粗胶原酶被半胱氨酸、EDTA 或邻菲咯啉等金属螯合剂抑制，但不受 DFP 抑制。它还被 α2-巨球蛋白（一种大血浆糖蛋白）抑制。Ca2+ 是酶活性所必需的。每种胶原酶的特定酶谱与获得研究细胞的组织（或细胞的用途）相关，并且由于相关性，Worthington 已经建立了几种类型的粗胶原酶：1、2、3 和 4 型。
• 1 型粗胶原酶具有胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。
• 2 型含有较高水平的蛋白酶活性，尤其是梭菌蛋白酶。
• 3 型含有最低水平的次级蛋白酶。
• 4 型的胰蛋白酶活性特别低，以限制对膜蛋白和受体的损伤。
• 5 型含有较高的胶原酶和酪蛋白酶值。
• 6 型含有高胶原酶活性，酪蛋白酶与胶原酶的比例为 ~2：1。相对于 I 型 （col G），设计用于富集 II 型 （col H） 胶原酶。
• 7 型胶原酶和酪蛋白酶的活性比 1 型和 2 型胶原酶高四倍。
• 纯化的胶原酶（代码：CLSPA）含有极少的次级蛋白水解活性和高胶原酶活性。
新增功能！ 无动物源型 AFA、AFB 和 AFC、STZ1 和 STZ2 胶原酶来源于在完全不含动物源性成分的培养基中生长的培养物，专为必须防止引入潜在动物源性病原体的生物加工应用而设计。次级蛋白酶的水平与 1 型和 2 型胶原酶相似。
CLSAFA 是原始的 AFA 等级，旨在具有类似于 1 型和 2 型胶原酶的胶原酶和次级蛋白酶。
CLSAFB 含有比 CLSAFA 更高的胶原酶和酪蛋白酶活性。
CLSAFC 具有特别低的胰蛋白酶活性，类似于 4 型胶原酶。
CLSAFD 的比活性比 CLSAFA 高 2 到 3 倍
纯化的胶原酶，代码 CLSAFP 含有最少的次生蛋白水解活性和高胶原酶活性。
STZ1 & STZ2,0.22μ过滤的STEMxyme® AOF胶原酶/中性蛋白酶（Dispase®）混合物，用于初级和干细胞分离。
Worthington 还提供每种类型的预包装 0.22 μm 过滤制剂，用于直接重构和用于细胞分离和培养程序。酶类型与不同组织的有效性之间的相关性一直很好，但并不完美，部分原因是使用参数的可变。然而，大多数研究人员认为粗胶原酶批次的组织分型是一项有价值的服务。Worthington 胶原酶和污染物检测的详细说明可在 Worthington 酶手册中找到。此外，组织特异性参考文献和详细的分离条件可在 Worthington 组织解离指南中找到。
胶原酶测定是 Mandl 的改良，其中胶原酶与天然胶原蛋白一起孵育 5 小时，并使用 Moore 和 Stein， JBC， 176， 367， （1948） 比色茚三酮法测定胶原蛋白分解的程度。释放的氨基酸表示为每毫克胶原酶的微摩尔亮氨酸。
用途：粗胶原酶广泛用于酶促原代细胞分离和组织解离程序。大多数研究人员使用粗胶原酶制剂，如 1、2、3 和 4 型或色谱纯化的胶原酶（代码：CLSPA）;后者通常与弹性蛋白酶、透明质酸酶等次级酶结合。为了获得最佳结果，必须根据要解离的组织定制蛋白水解活性的精确混合物。不同组织类型和有效性之间的相关性很好，但并不完美，可能部分取决于使用和目标参数以及批次间差异。有关更多信息，请参阅胶原酶采样计划信息。Worthington 还出版了一份组织解离指南，该指南提供了有关用于这些应用的酶的其他信息以及许多细胞和组织类型的具体参考。