染色液 超滤离心管 
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Lymphoprep 
 
产品编号: 07801  CAS号:  
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Lymphoprep
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Lymphoprep

 

产品货号:07801

产品名称:Lymphoprep

产品规格:250mL

产品简介:

Lymphoprep 人淋巴细胞分离液(即用型)

Lymphoprep是利用密度梯度离心从人外周血、脐带血、以及骨髓中分离出单个核细胞(MNC:Mononuclear cells)(包括淋巴细胞lymphocytes和单核细胞monocytes)的无菌、内毒素含量低的即用型分离液,具有与cytiva/思拓凡(原GE Healthcare)公司的昂贵的Ficoll-Paque PLUS和Ficoll-Paque PREMIUM分离液同样的指标。Lymphoprep可以用于替换Ficoll-Paque PLUS或Ficoll-Paque PREMIUM,而操作过程无需任何改变。

对于大多数正常人和病人的样本,Lymphoprep都能够快速、简单、可靠地得到优异的分离效果。

参数

主要成分:泛影葡胺钠(Sodium diatrizoate):9.1% (w/v);多聚糖(polysacccharide):5.7% (w/v)

密度:1.077±0.001g/ml

渗透性:290±15mOsm

内毒素含量:<1.0EU/ml

灭菌:已灭菌

分离所得单个核细胞中红细胞的含量:整个细胞数目的3-10%。

分离原理

单个核细胞(MNC)的密度低于粒细胞(Granulocytes)和红细胞(Erythrocytes),利用密度在1.077g/ml而且近于等渗的Lymphoprep溶液作为屏障作密度梯度离心时,红细胞和粒细胞由于密度大,故穿过Lymphoprep沉于底部,而单个核细胞密度等于或稍低于Lymphoprep分离液,故位于分离液界面上,从而在血浆和Lymphoprep的界面上获得单个核细胞。Lymphoprep分离液含有多聚糖(polysacccharide),多聚糖能增强红细胞的聚集,从而使红细胞更易于沉降。

使用方法

1、保证Lymphoprep分离液的温度在15度-25度。

2、去掉瓶盖,将瓶子颠倒几次,以保证瓶子内溶液均匀。

3、按下述方法用注射器或移液器吸出Lymphoprep分离液:

    注射器

    将瓶子倒过来至合适的角度,注射器针头扎过橡胶瓶盖,吸取所需体积的Lymphoprep分离液。

    移液器

提起铝环并拉下金属密封圈,取下银环。

使用无菌技术,取出橡胶瓶塞,取出所需体积的Lymphoprep分离液。

使用无菌技术,重新塞入橡胶瓶塞。

{C}4、{C}将吸取到的Lymphoprep分离液加到离心管中(体积的选择参照下表)

血液(mL)

稀释液(mL)

Lymphoprep(mL)

离心管(mL)

1

1

1.5

5

2

2

3

14

3

3

3

14

4

4

4

14

5

5

10

50

10

10

15

50

15

15

15

50

5、按照上表将血液稀释。

6、小心地将稀释后的血液铺加到离心管里面的Lymphoprep分离液上面,注意尽量不要将血液和分离液的界面混了,要界面分层清晰。

7、在室温下(20摄氏度左右),用水平转子离心机,关闭制动器的情况下,800g的离心力,离心20分钟。(如果血液存放时间超过2小时——从人体抽出算起,离心时间延长为30分钟)。

8、用移液管直接吸取血浆和Lymphoprep分离液界面处的淋巴细胞层,注意,不要去除上面的血液层,而是直接吸取。移至另一离心管中。

9、加入稀释液,离心,得到的沉淀即为单个核细胞,即可用于后续的实验。

注意事项:

该分离液用于人(也有客户反馈可以用于大鼠)。