BCA 蛋白定量试剂盒
产品简介：
目前世界上最常用的蛋白浓度检测方法是：BCA蛋白定量试剂盒(BCA Protein Assay Kit)和 Bradford 蛋白定量试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)。BCA 法与传统方法相比，更简单、更稳定、更灵敏。BCA法测定蛋白浓度兼容性亦很好，不受大部分样本中其他成分的影响，对于5%以内的SDS、Triton X-100、Tween 20、Tween 80具有很好的兼容性。BCA法测定蛋白浓度易受螯合剂、高浓度的还原剂影响。在 BCA 法测定蛋白浓度前，应尽量使 EDTA浓度≤m10M; DTT浓度≤1mM，2-ME≤0.01%。
    NobleRyder BCA Protein Assay Kit在50～1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系，其最小检出量为25μg/ml。
 
产品组成：
 

 
自备材料：
 
1、酶标仪或分光光度计
2、 96 孔板或离心管
3、恒温箱
 
操作步骤(仅供参考)：
1. 取适量 5mg/ml 蛋白标准，用 0.9%NaCl 或 PBS 稀释至终浓度为 0.5mg/ml。稀释后的 0.5mg/ml 蛋白标准也可以-20℃长期保存。
2.根据样品数量，按 50 体积 A 液加 1 体积 B 液配制适量 BCA 工作液，充分混匀。例如 5mlA 液加 100µlB 液，混匀，配制成 5.1ml 工作液。工作液室温 24 小时内稳定。
3. 将标准品按 0、1、2、4、8、12、16、20µl 加到 96 孔板的标准品孔中，加标准品稀释液，补足到 20µl。
4. 加适当体积样品到 96 孔板的样品孔中，加标准品稀释液到 20µl。
5. 各孔加入 200µlBCA 工作液，37℃放置 30 分钟。
注：也可以室温放置 2 小时，或 60℃放置 30 分钟。BCA 法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或适当延长孵育时间。
6. 测定 A562，540-595nm 之间的波长也可。根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。
 
注意事项：
1. 需酶标仪一台，测定波长为 540-595nm 之间，562nm 最佳。需 96 孔板。也可以使用普通的分光光度计测定，但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大 BCA 工作液的用量使其不小于最小检测体积，样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
2. 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请本公司生产的 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。
3. 为了加快 BCA 法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。
4.EDTA浓度必需小于 10mM，不兼容 EGTA。
5. 为了您的安全和健康，请穿戴实验服和一次性手套。
 
有效期： 12 个月有效。蛋白标准溶液-20℃冻存。