产品说明:
使用所示方法的不同pRSVcat DNA制备物通过脂质体介导的转染引入指定的细胞系,并且通过在40小时后测量CAT表达水平来确定效率。每个条形代表4次du立转染的平均值(2次转染,每次2个du立的质粒制备)。使用QIAGEN Plasmid Kits可以获得zui高的转染效率。
QIAGEN YZ-12145,质粒中提试剂盒100μg,Plasmid Midi Kit (100)性能
QIAGEN Plasmid Kits使用重力流QIAGEN阴离子交换吸头有效纯化质粒DNA。
从培养物中纯化高达10 mg(千兆),2.5 mg(mega),500μg(maxi),100μg(midi)和20μg(mini)高拷贝质粒DNA(培养体积取决于质粒拷贝数,插入物,宿主菌株和培养基的大小)。用QIAGEN质粒试剂盒纯化质粒DNA是非常适合于在应用,如使用转染(见图“ 转染效率对质粒纯化方法 ”),克隆和体外转录。
原理
QIAGEN-tip中独特的阴离子交换树脂专门用于核酸的纯化。其优异的分离特性使DNA纯度等于或优于通过两轮连续CsCl梯度离心获得的DNA纯度。预包装的QIAGEN-tip通过重力流动操作,永bu干燥,最da限度地缩短了质粒制备所需的手动操作时间。整个QIAGEN质粒纯化系统避免使用有毒物质,如苯fen,氯仿,溴化乙锭和CsCl,从而最da限du地减少对使用者和环境的危害。
使用QIAGEN Plasmid Kits,通过离心清除细菌裂解液。然后将澄清的裂解物上样到阴离子交换jian端上,其中质粒DNA在适当的低盐和pH条件下选择性结合。通过中盐洗涤除去RNA,蛋白质,代谢物和其他低分子量杂质,并在高盐缓冲液中洗脱纯质粒DNA(参见“ QIAGEN Plasmid Kit程序 ” 流程图)。通过异bing醇沉淀浓缩DNA并脱盐,并通过离心收集。
应用
使用QIAGEN Plasmid Kits纯化的质粒DNA非常适合用于以下应用:
转染
克隆
PCR
体外转录