产品说明:
克隆:K1系列
同型:IgG2a卡帕
产品类型:单克隆抗体
单位:500微克
主机:鼠
应用:酶联免疫吸附
流式细胞术
免疫亲和层析
免疫印迹
免疫细胞化学
免疫组化
背景:
该产品是SCICONS™产品线的一部分,该产品线提供了抗dsRNA抗体的黄金标准。
在过去的十年中,我们的双链RNA(dsRNA)抗体已被广泛用于检测和表征具有dsRNA基因组或中间体的植物和动物病毒。此外,抗dsRNA抗体可用作检测病原体的诊断工具,包括在石蜡包埋的固定组织样品中检测(Richardson等人,2010)。 K1 单克隆抗体可识别与我们广泛使用的 J2 抗体具有相似亲和力的 dsRNA。它可用于细胞和组织中dsRNA的组织学和细胞学检测。 事实证明,在J2不能提供令人满意的结果的罕见实验设置中,它作为J2的替代方法特别有用,可以解决交叉反应和/或去除不需要的背景。 K1 可用于检测肝炎病毒、泰勒鼠脑脊髓炎病毒或日本脑炎病毒等多种病毒的 dsRNA 中间体。它已用于检测培养细胞和固定石蜡包埋的组织学样品中的 dsRNA(参见出版物)。 如果需要检测Poly I:C,我们高度使用K1而不是J2,因为K1对这种合成的多核糖核苷酸具有更高的亲和力(参见Schönborn等人,1991,图2)。 K1 已成功用于免疫荧光显微镜、流式细胞术 (FACS) 和免疫捕获方法(如斑点印迹和 ELISA)。
同义词:小鼠抗dsRNA
来源:
雌性 DBA/2 小鼠腹膜内注射 50 ug L-dsRNA 和 75 ug 甲基化牛血清白蛋白的混合物,在完全弗氏佐剂中乳化。经过几次加强后,脾细胞与Sp2/0-Agl4骨髓瘤细胞融合,产生杂交瘤克隆。
产品展示
如果螺旋长度大于或等于 40 bp,则 mAb K1 可识别双链 RNA (dsRNA)。 dsRNA识别与抗原的序列和核苷酸组成无关。到目前为止,所有研究的天然存在的dsRNA(40-50种)以及poly(I).poly(C)和poly(A).poly(U)均已被K1识别。正如 Schönborn 等人所描述的。K1对poly(I).poly(C)的亲和力高于对其他dsRNA抗原的亲和力,尽管表观结合常数的差异在不同的实验条件下可能有所不同。
配方:冻干样品应用 500 μl 无菌蒸馏水复溶。然后,mAb 将置于不含任何稳定剂或防腐剂的 PBS 中,浓度为 1 mgr/ml。作为冻干程序的结果,重组抗体可能含有少量聚集体形式的变性蛋白,这可能会干扰某些应用,例如免疫组化(例如,通过提供高背景)。因此,我们强烈建议在使用前离心(微量离心)重组抗体并使用上清液。
纯化方法:蛋白 A-琼脂糖的亲和色谱法。
纯度:凝胶电泳纯 IgG 抗体。
浓度:复溶后的浓度:1.00 mg/ml,由 A280 nm 测定(A280 nm = 1.47 对应于 1 mg/ml 抗体)。
应用
MAb K1 可用于 ELISA、dsRNA 免疫印迹、免疫亲和层析,在某些系统中也可用于免疫组化(参见参考文献)。
对于任何特定应用,抗体的最佳工作稀释度都应通过滴定来确定。
请注意,在dsRNA免疫印迹之前,必须通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行核酸分离,因为琼脂糖凝胶印迹后检测的灵敏度要低得多。
不可用于临床目的。仅供体外使用。
储存
复溶后,抗体应分装并储存在 -20 °C 或 -70 °C。 加入10 mM叠氮化钠后,未稀释的抗体也可以在+4°C下短时间储存。对于长期储存,mAb应保持冷冻。应避免反复的冻融循环。当保持冻干时,该产品将在 -20 °C 或 -70°C 下保持稳定 10 年。
运输条件:在室温下运输。