一个世纪以来,生物学家们一直梦想着能够透过器官甚至整个机体,亲眼看到细胞连接和精细结构,现在随着组织透明化技术的完善,这一梦想终于成为了现实。
原理
VA-044 作为组织透明化技术中起关键作用的水溶性偶氮引发剂,普遍适用于高分子合成的水溶液聚合与乳液聚合。在 CLARITY 方法中,VA-044 作为引发剂,催化丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺和 PFA 形成水凝胶。
2013 年3 月,斯坦福大学的 Karl Deisseroth 博士领导的团队在自然杂志(Nature)上发表了 Structural and molecularinterrogation of intact biological systems 的论文,文中介绍了制备组织的方法 CLARITY。该方法是将组织浸透在水凝胶单体溶液中(Hydrogel Monomer Solution)中,经电泳使组织呈现透明。这种水溶胶—组织杂交的方式可以维持组织的原有结构,使生物分子结合到水凝胶的网孔上。重要的是脂类不会结合到水凝胶上,因而可以通过这种方式将脂类有效去除。通过这种方法制备的组织样品可用于后期的影像实验,免疫染色,原位杂交等实验。
CLARITY 可用于荧光蛋白质和抗体的免疫染色,可作为解析脑神经回路的有效工具。VA-044 是论文实验步骤中透明化工程的使用试剂。
特点• 优势
操作简单,固定蛋白后只需进行电泳;
可保持组织、器官和全身结构的完整性;
可进行原位杂交和免疫组化实验,可进行多轮染色和脱色步骤。
原理
VA-044 作为组织透明化技术中起关键作用的水溶性偶氮引发剂,普遍适用于高分子合成的水溶液聚合与乳液聚合。在 CLARITY 方法中,VA-044 作为引发剂,催化丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺和 PFA 形成水凝胶。
2013 年3 月,斯坦福大学的 Karl Deisseroth 博士领导的团队在自然杂志(Nature)上发表了 Structural and molecularinterrogation of intact biological systems 的论文,文中介绍了制备组织的方法 CLARITY。该方法是将组织浸透在水凝胶单体溶液中(Hydrogel Monomer Solution)中,经电泳使组织呈现透明。这种水溶胶—组织杂交的方式可以维持组织的原有结构,使生物分子结合到水凝胶的网孔上。重要的是脂类不会结合到水凝胶上,因而可以通过这种方式将脂类有效去除。通过这种方法制备的组织样品可用于后期的影像实验,免疫染色,原位杂交等实验。
CLARITY 可用于荧光蛋白质和抗体的免疫染色,可作为解析脑神经回路的有效工具。VA-044 是论文实验步骤中透明化工程的使用试剂。
特点• 优势
操作简单,固定蛋白后只需进行电泳;
可保持组织、器官和全身结构的完整性;
可进行原位杂交和免疫组化实验,可进行多轮染色和脱色步骤。