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Caspase 1 活性检测试剂盒(比色法) 
 
产品编号: C4901  CAS号:  
分子式:   分子量:  
EINECS编号:  
Caspase 1 活性检测试剂盒(比色法)
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Caspase 1活性检测试剂盒(比色法)

产品简介:

Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)家族在介导细胞凋亡过程的起着极其重要的作用,其成员包括Caspase1~11等,均属于蛋白酶家族。Caspase 1又称Interkeukin 1 conberting enzyme (ICE)或caspase-1,是唯一可以剪切IL-1前体蛋白或IL-18前体产生相应成熟细胞因子的Caspase家族成员。Caspase 1可以把45kD的Caspase 1前体蛋白剪切成20kD和10kD的片断,该片断可以形成异源二聚体,进一步由两个异源二聚体形成具有蛋白酶活性的四聚体。Caspase 1通过剪切Bcl-XL来调节细胞凋亡,并通过对一些细胞因子前体的剪切来调控相关免疫反应。

NobleRyder Caspase 1活性检测试剂盒(比色法) (Caspase 1 Colorimetric Assay Kit) 的检测原理是利用Caspase 1催化底物acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp p-nitroanilide (Ac-YVAD-pNA)产生黄色的游离硝基苯胺pNA(p-nitroaniline),通过测定分光光度比色法测定pNA在400~410nm处吸光值,从而间接获得caspase 1的活性。

 

产品组成:

                       编号

名称

C4901

50T

C4901

100T

Storage

试剂(A): Caspase Lysis buffer

10ml

20ml

4℃

试剂(B): Assay buffer

10ml

20ml

4℃

试剂(C): Ac-YVAD-pNA(2mM)

0.25ml×2

0.25ml×4

-20℃ 避光

试剂(D): pNA(10mM)

0.25ml×2

0.25ml×4

-20℃ 避光

使用说明书

1份

 

自备材料:

1.水浴锅或恒温箱

2.96孔板

3.酶标仪或分光光度计

 

 

 

空白对照

高酶活性样品

低酶活性样品

Assay buffer

90μl

85μl

65μl

待测样品

0μl

5μl

25μl

Ac-YVAD-pNA(2mM)

10μl

10μl

10μl

总体积

100μl

100μl

100μl

 

 

 

注意事项:

1.建议每次测定时都做标准曲线,以使标准更准确,另外标准品需避免反复冻融。

.2如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但应考虑根据比色杯的最小检测体积,尽量采用100μl体积以内的比色杯。

3.所测样本的值高于标准曲线的上限,应用裂解液稀释样品后重新测定。

4.样品蛋白有效含量过低或Caspase激活水平过低都会导致实际测得的A405过低,应注意使蛋白浓度尽量达到1~3μg/ml,调整诱导凋亡的时间和条件。

 

有效期:12个月有效。