AAT Bioquest YZ-1353 Buccutite™ Rapid PerCP Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction*
产品说明:
PerCP(Peridinin-叶绿素-蛋白质复合物)是从恐龙科植物中分离出来的。它具有极高的消光系数,高量子效率和较大的斯托克斯位移。它在488nm处的氩激光中激发良好,其最大发射峰在677 nm处。亚洲空运中心生物探索提供这款Buccutite™快速标记试剂盒,以促进PerCP与抗体和其他蛋白质(如链霉亲和素和其他二级试剂)的偶联。颊铁矿™ PerCP 偶联试剂盒提供了一种稳健而方便的抗体与 PerCP 偶联的方法。该试剂盒包括预活化的 PerCP 和反应缓冲液。整个过程只需要两次简单的混合,无需进一步纯化。偶联抗体可用于流式细胞术、WB、ELISA 和 IHC 应用。该试剂盒足以进行 2 次标记反应,每次最多 25 ug 抗体。任何新抗体试剂的最佳比例都必须通过实验确定。我们的试剂盒提供预活化的 PerCP,以促进 PerCP 与抗体和其他蛋白质(如链霉亲和素和其他二级试剂)的偶联。我们的预活化 PerCP 已准备好偶联,与传统繁琐的基于 SMCC 的偶联化学相比,产量要高得多。此外,我们的预活化 PerCP 通过蛋白质中丰富的氨基与蛋白质偶联,而 SMCC 化学针对必须通过还原抗体再生的硫醇基团。
组件
组分 A:颊铁矿™ FOL 活化的 PerCP 2瓶
组件 B:颊铁矿™ MTA 1瓶
组分C:反应缓冲液 1 瓶 (20 μL)
示例协议
一目了然
协议摘要
重要 收到后,将套件存放在 4oC.如果储存得当,试剂盒应稳定六个月。或者,组分A和B可以储存在-20°C。 不要冷冻反应缓冲液(组分C)。在打开之前加热所有组分并短暂离心小瓶,并在开始偶联之前立即准备所需的溶液。以下SOP是标记山羊抗小鼠IgG抗体的示例。
工作溶液的制备
1.抗体工作溶液
要标记 25 μg 抗体(假设目标抗体浓度为 1 mg/mL),请将 1.25 μL(占总反应体积的 5%)反应缓冲液(组分 C)与 25 μL 目标抗体溶液混合。
注意 如果您有不同的浓度,请相应地调整抗体体积,使~25 μg抗体可用于标记反应。
注意抗体应溶解在1X磷酸盐缓冲盐水(PBS),pH 7.2-7.4中;如果将抗体溶解在甘氨酸缓冲液中,则必须用1X PBS,pH 7.2-7.4进行透析,或使用Amicon Ultra-0.5,Ultracel-10膜,10 kDa(墨镜#UFC501008来自密理博)去除广泛用于抗体沉淀的游离胺或铵盐(如**铵和乙**)。
注意 不纯抗体或用牛血清白蛋白 (BSA) 或明胶稳定的抗体不会很好地标记。
注意 如果抗体浓度低于 1 mg/mL,抗体 – 颊铁矿™ MTA 反应效率会显着降低。为了获得最佳标记效率,建议最终抗体浓度范围为1-10 mg/mL。
2. 颊钛MTA ™工作解决方案
将 10 μL DMSO(未提供)加入小瓶中的颊铁矿 ™ MTA(组分 B)。
3. 颊铁矿 ™ FOL 活化 PerCP 工作溶液
添加 25 μL ddH2O放入Buccutite ™ FOL活化的PerCP(组分A)的小瓶中。
实验方案样本
运行抗体-颊铁矿™ MTA反应
进行抗体-全*乙酸偶联
注意 对于长期储存,抗体-PerCP 偶联溶液需要浓缩或冷冻干燥。
抗体-全*乙烯偶联物的储存
抗体偶联物应在载体蛋白(例如 0.1% 牛血清白蛋白)和 0.02-0.05% 叠氮化钠存在下储存。Ab-PE偶联物溶液可在4 °C下保存两个月,无明显变化,避光保存。
产品说明:
消光系数(厘米-1M-1) |
激发(纳米) |
发射(纳米) |
350000 | 482 | 678 |
组件
组分 A:颊铁矿™ FOL 活化的 PerCP 2瓶
组件 B:颊铁矿™ MTA 1瓶
组分C:反应缓冲液 1 瓶 (20 μL)
示例协议
一目了然
协议摘要
- 将1.25μl反应缓冲液(组分C)加入抗体(25μl)中
- 加入2.5μl颊铁矿™ MTA工作溶液
- 在室温下孵育 30 - 60 分钟
- 与 50 μL 颊铁矿™ FOL 活化的 PerCP 工作溶液混合
- 在室温下孵育60分钟
重要 收到后,将套件存放在 4oC.如果储存得当,试剂盒应稳定六个月。或者,组分A和B可以储存在-20°C。 不要冷冻反应缓冲液(组分C)。在打开之前加热所有组分并短暂离心小瓶,并在开始偶联之前立即准备所需的溶液。以下SOP是标记山羊抗小鼠IgG抗体的示例。
工作溶液的制备
1.抗体工作溶液
要标记 25 μg 抗体(假设目标抗体浓度为 1 mg/mL),请将 1.25 μL(占总反应体积的 5%)反应缓冲液(组分 C)与 25 μL 目标抗体溶液混合。
注意 如果您有不同的浓度,请相应地调整抗体体积,使~25 μg抗体可用于标记反应。
注意抗体应溶解在1X磷酸盐缓冲盐水(PBS),pH 7.2-7.4中;如果将抗体溶解在甘氨酸缓冲液中,则必须用1X PBS,pH 7.2-7.4进行透析,或使用Amicon Ultra-0.5,Ultracel-10膜,10 kDa(墨镜#UFC501008来自密理博)去除广泛用于抗体沉淀的游离胺或铵盐(如**铵和乙**)。
注意 不纯抗体或用牛血清白蛋白 (BSA) 或明胶稳定的抗体不会很好地标记。
注意 如果抗体浓度低于 1 mg/mL,抗体 – 颊铁矿™ MTA 反应效率会显着降低。为了获得最佳标记效率,建议最终抗体浓度范围为1-10 mg/mL。
2. 颊钛MTA ™工作解决方案
将 10 μL DMSO(未提供)加入小瓶中的颊铁矿 ™ MTA(组分 B)。
3. 颊铁矿 ™ FOL 活化 PerCP 工作溶液
添加 25 μL ddH2O放入Buccutite ™ FOL活化的PerCP(组分A)的小瓶中。
实验方案样本
运行抗体-颊铁矿™ MTA反应
- 将 2.5 μL Buccutite ™ MTA 工作溶液加入抗体工作溶液中,并通过反复移液几次或涡旋小瓶几秒钟将它们充分混合。
- 将抗体-颊石™ MTA反应混合物在室温下保持30-60分钟。
进行抗体-全*乙酸偶联
- 加入 50 μL 含有抗体颊钛 MTA 溶液的颊颊™石™ FOL 活化 PerCP 工作溶液,通过重复移液几次或涡旋小瓶几秒钟充分混合。
- 孵育 1 - 2 小时。
- 抗体-PerCP 偶联物现已准备就绪。
注意 对于长期储存,抗体-PerCP 偶联溶液需要浓缩或冷冻干燥。
抗体-全*乙烯偶联物的储存
抗体偶联物应在载体蛋白(例如 0.1% 牛血清白蛋白)和 0.02-0.05% 叠氮化钠存在下储存。Ab-PE偶联物溶液可在4 °C下保存两个月,无明显变化,避光保存。