产品说明:
RereadyUse™离心色谱柱填充聚丙烯酰胺P-6-DG基质,用于缓冲液交换和脱盐应用。将材料涂覆到离心柱上时,小于色谱柱排除限(MW~6000)的物质将保留在色谱柱中,蛋白质等大分子(MW高于15,000)将用缓冲液洗脱。样品体积范围为 30 uL 至 100 uL。它们与带有 2.0 ml 微量离心管或 12 x 75 试管的摆动桶离心机兼容。
实验方案样本
RCF = 相对离心力,
RPM = 转子的速度
r = 从转子中心到 Bio-Spin 柱中间测量的半径(以厘米为单位)
RereadyUse™离心色谱柱填充聚丙烯酰胺P-6-DG基质,用于缓冲液交换和脱盐应用。将材料涂覆到离心柱上时,小于色谱柱排除限(MW~6000)的物质将保留在色谱柱中,蛋白质等大分子(MW高于15,000)将用缓冲液洗脱。样品体积范围为 30 uL 至 100 uL。它们与带有 2.0 ml 微量离心管或 12 x 75 试管的摆动桶离心机兼容。
实验方案样本
- 多次倒置离心柱以悬浮沉降的凝胶并去除任何气泡。
- 折断吸头并将色谱柱放入微量离心管(2 mL)中。取下盖子,让多余的填料缓冲液通过重力排出,直到到达凝胶床的顶部。如果色谱柱没有开始流动,请将盖子推回色谱柱中,然后再次将其取下以开始流动。丢弃排出的缓冲液,然后将色谱柱放回试管中。
- 在摆动桶离心机中以1,1×g离心000分钟以除去保全缓冲液。丢弃缓冲区。
- 将您选择的1 mL平衡缓冲液涂在色谱柱上,让缓冲液通过重力排出,或将色谱柱离心1分钟以除去缓冲液。丢弃收集管中的缓冲液。重复此过程 3-4 次。
- 在2,1×g的摆动桶离心机中离心000分钟以除去反应缓冲液。丢弃缓冲区。
- 将色谱柱放入干净的2.0 ml微量离心管或12 x 75 mm试管中。小心地将样品(20-100μl)直接涂在色谱柱的顶部中心。可能需要仔细调整样品体积以达到最佳性能。
- 加载样品后,将色谱柱以5,1 x g 离心000分钟。
- 离心后,纯化的样品现在处于平衡缓冲液中,小于色谱柱排阻限(~6000)的分子将被保留。
- 收集洗脱液,并妥善处理用过的色谱柱。注意:离心柱可装入 2 mL 微量离心管或 12 x 75 mm 试管中,以便在离心过程中采集样品。使用色谱柱随附的2 mL微量离心管进行初始色谱柱平衡步骤。注意:能够产生最小力为 1,000 x g 的摆动式斗式离心机适用于 Bio-Spin 色谱柱。在特定转速下产生的引力是微量离心机转子半径的函数。有关从每分钟转数 (RPM) 转换为离心力或重力的信息,请参阅水平吊篮离心机使用手册。或者,使用下面显示的公式来计算达到 1,000 x g 重力所需的速度(以 RPM 为单位)。
RCF = 相对离心力,
RPM = 转子的速度
r = 从转子中心到 Bio-Spin 柱中间测量的半径(以厘米为单位)