染色液 超滤离心管 
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Amplite 荧光法内毒素检测试剂盒 
Amplite® Fluorimetric Endotoxin Detection Kit 
产品编号: YZ-60006  CAS号:  
分子式:   分子量:  
EINECS编号:  
Amplite 荧光法内毒素检测试剂盒
我们提供不同包装规格的产品,有需要请电联。
产品说明:
脂多糖(LPS),也称为内毒素,是革兰氏阴性菌外膜的主要成分。LPS是脊椎动物先天免疫系统的有效刺激剂,可引起发烧,感染性休克并最终死亡。LPS也被认为是检测细菌病原体入侵的生物标志物,并在极端情况下负责炎症反应和内毒性休克的发展。检测蛋白质、肽或抗体样品等生物材料中的LPS是生物制造和加工中的一项关键任务。Amplite®荧光内毒素检测试剂盒使用内毒素绿™,这是一种敏感的荧光底物。内毒素绿™在内毒素和鲎变形细胞裂解物(LAL)的存在下水解,LAL是鲎的血细胞提取物。内毒素绿™的水解产物产生强烈的绿色荧光。内毒素活性与内毒素绿™水解产生的荧光强度成正比。Amplite®荧光内毒素检测试剂盒可以检测多种内毒素(从1 EU/ml到0.001 EU/ml)。它非常灵敏,可在 0 分钟内检测到低至 001.30 EU/mL 的内毒素。
 
组件
组件 A:   1瓶
组件 B:    1 瓶 (25 毫升)
组件 C:   1瓶
组成D:    1 瓶 (100 EU/mL)
构成部分E:    1 瓶 (100 μL)
 
示例协议
 
协议摘要
 
  1. 制备内毒素绿色™工作溶液
  2. 加入大肠杆菌内毒素标准品和测试样品(25 μL)
  3. 加入鲎变形细胞裂解液(25 μL)
  4. 在37°C孵育30分钟
  5. 添加内毒素绿色™工作溶液(50 μL)
  6. 在 490 分钟内读取 Ex/Em=525/10 nm 处的荧光强度
 
重要
在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。
实验中使用的所有材料都应不含内毒素,例如:一次性试管或 1.5 mL 微量离心管、一次性移液器吸头和一次性 96 孔微孔板或板条。所有实验室器具的清洁度都需要准确检测给定样品中的内毒素水平。
 
储备溶液的制备
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
 
1. 100 X 内毒素绿色™储备液
将 50 μL DMSO 加入内毒素绿(组分 A)小瓶中,制成 100X 内毒素绿™™储备溶液。
注意 避光。
 
2. 5X鲎变形细胞裂解液
将 500 μL 无内毒素水(组分 B)加入鲎变形细胞裂解物(组分 C)小瓶中,制成 5X 鲎变形细胞裂解液溶液。
 
标准溶液的制备
大肠杆菌内毒素标准溶液
将 10 μL 100 EU/mL 大肠杆菌内毒素标准溶液加入 990 μL 无内毒素水(组分 B)中,生成 1 EU/mL 大肠杆菌内毒素标准溶液 (ES1)。然后取1 EU/mL大肠杆菌内毒素标准溶液(ES1),在无内毒素水(组分B)中进行1:3连续稀释,得到连续稀释的大肠杆菌内毒素标准品(ES2 - ES7)。
 
工作溶液的制备
1.内毒素绿色™工作溶液
将 50 μL 内毒素绿色储备溶液加入 5 mL 无内毒素水(组分 B)中,制成总体积为 5.05 mL 的内毒素绿色™™工作溶液。
说明 根据需要准备内毒素绿™工作溶液的量。保持工作溶液避光。
 
2. 鲎变形细胞裂解物(LAL)工作溶液
将 500 μL 鲎变形细胞裂解物 (LAL) 储备溶液加入 2 mL 无内毒素水(组分 B)中,制成总体积为 2.5 mL 的鲎变形细胞裂解物 (LAL) 工作溶液。
注意 根据需要和使用前准备LAL工作溶液的量。使用不含内毒素的瓶子或管子。