产品说明：
        丙二醛（MDA）和4-羟基壬烯醛（4-HNE）是脂质过氧化的天然副产物。作为脂质过氧化最流行和最可靠的生物标志物，MDA多年来一直广泛用于确定临床情况下的氧化应激。因此，MDA的定量对于评估病理生理过程中的氧化应激至关重要。Amplite®荧光丙二醛（MDA）定量试剂盒提供了一种快速便捷的MDA测量方法，无需其他供应商的商用MDA检测试剂盒所需的加热步骤。单醛蓝™本身几乎是无荧光的，但在与MDA反应时会产生强烈的蓝色荧光。
 
组件
组分A：Monoaldelite^TMBlue  2瓶（冻干粉）
组分B：检测缓冲液     1 瓶 （20 mL）
组件C：MDA标准 1瓶（冻干粉）
组分D：反应溶液  1 瓶 （5 mL）
构成部分E：DMSO     1 瓶 （100 μL）
 
示例协议
 
一目了然
协议摘要
 

1. 制备并添加MDA标准品或测试样品（50 μL）
2. 制备并添加MDA工作溶液（50 μL）
3. 在室温下孵育 10 至 30 分钟
4. 加入反应溶液 （25 μL）
5. 在室温下孵育 30 至 60 分钟
6. 监测Ex/Em = 365/435 nm处的荧光强度

 
重要说明
在开始实验之前，将所有试剂盒组分解冻至室温。
 
储备液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. MDA标准溶液（100 mM）：
加入100 μL ddH2O放入MDA标准品（组分C）的小瓶中，制成100 mM MDA标准溶液。
 
2. Monoaldelite^TM蓝色储备液 （250X）：
将 20 μL DMSO（组分 E）加入一瓶Monoaldelite^TM蓝色（组分A）制造Monoaldelite^TM蓝色储备溶液。注意：这Monoaldelite^TM蓝色储备溶液足以用于一个 96 孔板。它不稳定，请及时使用。
 
标准溶液的制备
MDA标准
 
将 10 μL 100 mM MDA 标准溶液加入 990 μL 检测缓冲液（组分 B）中，生成 1000 μM MDA 标准溶液 （MDA7）。取1000 μM MDA标准溶液（MDA7）并进行1：3连续稀释，以获得带有测定缓冲液（组分B）的连续稀释的MDA标准品（MDA6 - MDA1）。
 
工作溶液的制备
Monoaldelite^TM蓝色工作溶液：
加入 20 μL 250X Monoaldelite^TM将蓝色储备溶液放入 5 mL 检测缓冲液（组分 B）中并充分混合。
 
实验方案样本
表 1.MDA标准品和测试样品在纯黑色96孔微孔板中的布局。MDA=MDA标准品（MDA1 - MDA7，1.37至1000μM），BL=空白对照，TS=测试样品。
 
提单     提单     TS  TS
MDA1  MDA1  ...   ...
MDA2  MDA2  ...   ...
MDA3  MDA3       
MDA4  MDA4       
MDA5  MDA5       
MDA6  MDA6       
MDA7  MDA7       
表 2.每个孔的试剂组成。
 
井  卷  试剂
MDA1 - MDA7     50 微升     连续稀释（1.37 至 1000 μM）
提单     50 微升     检测缓冲液（组分B）
TS  50 微升     测试样品
 

1. 根据表1和表2中提供的布局添加MDA标准品（MDA），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于 384 孔板，每孔使用 25 μL 试剂而不是 50 μL。

 

2. 向MDA标准品、空白对照和测试样品的每个孔中加入50 μL MDA工作溶液，使总测定体积为100 μL/孔。对于 384 孔板，向每个孔中加入 25 μL MDA 工作溶液，总体积为 50 μL/孔。

 

3. 将反应在室温下孵育10-30分钟。

 

4. 向每个孔中加入 25 μL 反应溶液（组分 D），使总测定体积为 125 μL/孔。对于 384 孔板，将 12.5 μL 反应溶液（组分 D）添加到每个孔中，总体积为 62.5 μL/孔。

 

5. 将反应在室温下孵育30-60分钟。

 

6. 用荧光酶标仪在Ex / Em = 365/435 nm（截止= 420 nm）监测荧光增加。