产品说明：
传统的BCA蛋白质测定广泛用于定量蛋白质。然而，它缓慢而乏味，例如，您必须在37°C下加热BCA反应30分钟或在室温下等待两个小时。Amplite®™ 比色法 BCA 蛋白定量检测试剂盒是一种双组分且与去垢剂兼容的检测试剂盒，用于测定总蛋白浓度。该测定基于相同的铜螯合反应，并提供与传统的BCA蛋白测定相当的准确性，后者在高温下运行或具有更长的孵育时间。在 560 nm 附近监测蛋白质信号，并在 30 分钟内完成测定。它方便、快速、坚固，无需高温。Amplite®™ 比色 BCA 蛋白质定量检测试剂盒可以采用方便的 96 孔微量滴定板形式进行，无需分离步骤即可轻松适应自动化。
 
组件
组件 A：   50毫升
组件 B：    1毫升
组分C：BSA标准品（2毫克/毫升）    1毫升
 
示例协议
 
一目了然
协议摘要

1. 制备支链氨基酸工作溶液（50 μL）
2. 添加 BSA 标准品或测试样品 （50 μL）
3. 在室温下孵育 20 - 60 分钟
4. 读取 562 nm 处的吸光度（在 540-590 nm 范围内）

 
重要
使用前在室温下解冻所有试剂盒组件。
 
标准溶液的制备
BSA标准
将 80 μL 2 mg/mL BSA 标准品（组分 C）加入 320 μL PBS（未提供）中，生成 400 μg/mL BSA 标准溶液 （BS1）。然后在PBS中使用1：2系列稀释液以获得连续稀释的BSA标准品（BS2 - BS7）。注意：有必要在每次测定期间创建标准曲线。
 
工作溶液的制备
支链氨基酸工作解决方案

1. 通过将50份BCA溶液A（组分A）与1份BCA溶液B（组分B）（溶液A：B的v/v比）混合，制备所需的BCA工作溶液量。
2. 充分混合，直到BCA工作溶液呈均匀的浅绿色。

注意 1 mL BCA 工作溶液足以进行 20 次测试。
 
实验方案样本
表 1.BSA标准品和测试样品在透明底部96孔微孔板中的布局。BS= BSA 标准品（BS1 - BS7，400 至 6.25 μg/mL）;BL=空白控件;TS=测试样品

BS1	BS1	TS	TS
BS2	BS2	---	---
BS3	BS3
BS4	BS4
BS5	BS5
BS6	BS6
BS7	BS7
提单	提单

表 2.每个孔的试剂组成。

井	卷	试剂
BS1-BS7	50 微升	连续稀释 （400-6.25 μg/mL）
提单	50 微升	PBS
TS	50 微升	测试样品

 

1. 根据表1和表2中提供的布局制备BSA标准品（BS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。
2. 向BSA标准品、空白对照和测试样品的每个孔中加入50 μL BCA工作溶液，使总测定体积为100 μL/孔。
3. 将反应在室温下孵育20至60分钟。
4. 用吸光度酶标仪在OD 562nm（在540至590nm范围内）监测吸光度。