产品说明：
       过氧化*（H2O2）是一种活性氧代谢副产物，可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。它涉及许多与哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松症、许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物事件。也许过氧化*生物学最有趣的方面是最近的报道，即抗体具有将分子氧转化为过氧化*的能力，有助于免疫系统的正常识别和破坏过程。测量这种反应性物质将有助于确定氧化应激如何调节不同的细胞内途径。该细胞计™过氧化*检测试剂盒使用我们独特的OxiVision™ Green过氧化*传感器来量化活细胞中的过氧化*。OxiVision™ Green是细胞渗透性的，当它与过氧化*反应时会产生绿色荧光。该试剂盒是一种优化的“混合和读取”检测形式，与 HTS 液体处理仪器兼容。
 
组件
组件 A：   1瓶
组分B：H2O2 1 瓶（3% 稳定溶液，200 μL）
组分C：检测缓冲液     1 瓶 （20 mL）
组件D：二甲基丙*酸甲*    1 瓶 （200 μL）
 
示例协议
 
一目了然
溶液分析方案摘要
 

1. 准备并添加 Amplite™ 绿色过氧化物传感器工作溶液 （50 μL）
2. 添加 H2O2标准品或测试样品 （50 μL）
3. 在室温下孵育 15 - 60 分钟
4. 读取Ex/Em = 490/525 nm时的荧光强度（截止= 515 nm）

 
重要说明
在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒成分。
 
活细胞检测方案摘要

1. 在生长培养基中制备细胞
2. 用Amplite™绿色过氧化物传感器工作溶液对细胞进行染色，并孵育所需的时间
3. 用测试化合物处理细胞
4. 在Ex/Em = 490/525 nm（截止= 515 nm）下监测荧光强度，底部读取模式

 
重要说明
Amplite™ 绿色过氧化物传感器可以被动加载到活细胞中并报告细胞内 H 的微摩尔变化2O2浓度。以下是建议的显微镜成像方案，可以修改以满足特定的研究需求。
 
储备液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
 
1. 安培绿色过氧化物传感器储备溶液 （250X）：
将 50 μL DMSO（组分 D）加入安培绿色过氧化物传感器（组分 A）的小瓶中，制成 250X 安培™™绿色过氧化物™传感器储备溶液。避光。
 
2. H₂O₂标准溶液 （20 mM）：
加入 22.7 μL 的 3% H2O2（0.88 M，组分 B）放入 977 μL 检测缓冲液（组分 C）中，制成 20 mM H₂O₂标准解决方案。注意：稀释后的H₂O₂标准溶液不稳定。未使用的部分应丢弃。
 
标准溶液的制备
H₂O₂ 标准
加入 50 μL 20 mM H2O2标准溶液到 950 μL 检测缓冲液（组分 C）中，得到 1000 μM H₂O₂标准解决方案。取 1000 μM H₂O₂标准溶液并进行 1：3 连续稀释以获得连续稀释的 H₂O₂标准品（HS1 - HS7）与测定缓冲液（组分C）。
 
工作溶液的制备
将 20 μL 250X 安培™绿色过氧化物传感器储备溶液加入 5 mL 检测缓冲液（组分 C）中，制成 Amplite™ 绿色过氧化物传感器工作溶液。
 
实验方案样本

1. 准备H₂O₂标准品（HS）、空白对照（BL）和测试样品（TS）根据表1和表2中提供的布局。对于 384 孔板，每孔使用 25 μL 试剂而不是 50 μL。
2. 向每个 H 孔中加入 50 μL Amplite™ 绿色过氧化物传感器工作溶液₂O₂标准、空白对照和测试样品，使总H₂O₂测定体积为 100 μL/孔。对于 384 孔板，将 25 μL Amplite™ 绿色过氧化物传感器工作溶液添加到每个孔中，总体积为 50 μL/孔。
3. 将反应在室温下孵育15至30分钟，避光。
4. 使用荧光酶标仪监测荧光增加，激发= 490±10，发射= 520±10nm（最佳Ex / Em = 490 / 525 nm，截止= 515 nm）。

 
运行H₂O₂活细胞测定：

1. 根据需要激活单元格。
2. 用PBS缓冲液洗涤细胞，用100μL/孔Amplite™绿色过氧化物传感器工作溶液孵育细胞5至60分钟或您想要的时间。对于 384 孔板，加入 25 μL/孔的 Amplite™ 绿色过氧化物传感器工作溶液。注意：对于动力学测量，可以在添加处理之前对细胞进行染色。
3. 使用荧光板读数器（底部读取模式）在Ex / Em = 490 / 525 nm（截止= 515 nm）下监测荧光增加，或使用FITC通道用荧光显微镜对荧光变化进行成像。