产品说明:
过氧化*是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。它涉及许多与哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松症、许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物事件。这种反应性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。该细胞计™细胞内荧光过氧化*检测试剂盒使用我们独特的OxiVision™ Blue过氧化物传感器来量化活细胞中的过氧化*。OxiVision™ 蓝色过氧化物传感器具有细胞渗透性,与过氧化*反应时会产生蓝色荧光。该试剂盒提供了一种灵敏的工具,用于监测活细胞中的过氧化*水平,并经过优化,可用于流式细胞术。
组件
组件 A:OxiVision™蓝色过氧化物传感器 1瓶
组件B:DMSO 1 瓶 (200 μL)
示例协议
一目了然
协议摘要
重要注意事项
在开始实验之前,在室温下解冻试剂盒组件。
储备液的制备
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备溶液:
将 100 μL DMSO(组分 B)加入 OxiVision™™ 蓝色过氧化物传感器(组分 A)的小瓶中,并充分混合。注意:1 μL 重构的 OxiVision™ 蓝色过氧化物传感器储备溶液足以用于 0.5 mL 细胞。应及时使用储备溶液。避光保存。
实验方案样本
过氧化*是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。它涉及许多与哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松症、许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物事件。这种反应性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。该细胞计™细胞内荧光过氧化*检测试剂盒使用我们独特的OxiVision™ Blue过氧化物传感器来量化活细胞中的过氧化*。OxiVision™ 蓝色过氧化物传感器具有细胞渗透性,与过氧化*反应时会产生蓝色荧光。该试剂盒提供了一种灵敏的工具,用于监测活细胞中的过氧化*水平,并经过优化,可用于流式细胞术。
组件
组件 A:OxiVision™蓝色过氧化物传感器 1瓶
组件B:DMSO 1 瓶 (200 μL)
示例协议
一目了然
协议摘要
- 在生长培养基中制备细胞
- 使用OxiVision™蓝色过氧化物传感器对细胞进行染色
- 用测试化合物处理细胞
- 使用流式细胞仪监测荧光强度 太平洋蓝色通道 (Ex/Em = 405/450 nm)
重要注意事项
在开始实验之前,在室温下解冻试剂盒组件。
储备液的制备
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备溶液:
将 100 μL DMSO(组分 B)加入 OxiVision™™ 蓝色过氧化物传感器(组分 A)的小瓶中,并充分混合。注意:1 μL 重构的 OxiVision™ 蓝色过氧化物传感器储备溶液足以用于 0.5 mL 细胞。应及时使用储备溶液。避光保存。
实验方案样本
- 用 OxiVision™ 蓝色过氧化物传感器储备溶液在全培养基或所需的缓冲液中在 37°C 下染色细胞 20 - 30 分钟,避光。
- 用测试化合物在全培养基中或在所需的缓冲液中在 37°C 下处理细胞所需的时间。对于对照样品(未处理的细胞),加入相应量的复合缓冲液。注意:建议在全培养基中处理细胞。但是,如果测试化合物对血清敏感,则可以在治疗前吸走生长培养基和血清因子。抽吸后将细胞重悬于1X Hank盐溶液和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液中。或者,可以在无血清培养基中处理细胞。注意:我们在100°C的全培养基中用37μM过氧化*处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化*。
- 使用流式细胞仪监测太平洋蓝通道(Ex / Em = 405 / 450 nm)的荧光强度。对感兴趣的细胞进行门控,不包括碎片。