产品说明：
        乳酸是手性的，具有两种光学异构体：L-乳酸和D-乳酸。乳酸在新陈代谢和运动过程中通过乳酸脱氢酶（LDH）不断由**酸产生。监测乳酸水平是评估组织需氧量和利用量之间平衡的好方法，在研究细胞和动物生理学时很有用。D-乳酸不被哺乳动物代谢，其从体内消除主要取决于肾脏排泄。D-和L-乳酸存在于许多发酵乳制品中，如酸奶和奶酪，也存在于腌制蔬菜和腌制肉类和鱼类中。D-和L-乳酸（由细菌产生）是食物的质量指标，如鸡蛋、牛奶、果汁和葡萄酒。血液中异常高浓度的D-乳酸通常反映了胃肠道中细菌过度生长。亚洲空运中心Bioquest的Amplite®乳酸检测试剂盒（L-乳酸检测的Cat#13814和13815，D-乳酸检测的Cat#13810和13811）提供基于荧光和吸光度的方法，用于检测血清、血浆、尿液等生物样品以及细胞培养样品中的L-乳酸或D-乳酸。在酶偶联测定中，乳酸与NADH成比例相关，NADH由荧光NADH传感器特异性监测。荧光酶标仪可以读取信号。使用这款荧光Amplite ® L-乳酸检测试剂盒，我们能够在 1 μL 反应体积中检测到低至 4.100 μM 的 L-乳酸。
 
平台
 
荧光酶标仪
Excitation  540 纳米
Emission    590 纳米
Cutoff     570 纳米
推荐板  纯黑色
 
组件
组分A：酶混合物      2瓶（冻干粉）
组分B：检测缓冲液     1 瓶 （10 mL）
组件 C：NAD         1瓶
组分D：L-乳酸标准品  2.25毫克/瓶
 
示例协议
 
一目了然
协议摘要
 

1. 制备L-乳酸工作溶液（50μL）
2. 加入L-乳酸标准品或测试样品（50 μL）
3. 在室温下孵育30分钟 - 2小时
4. 在Ex/Em = 540/590 nm处监测荧光增加

 
重要注意事项
在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分的一小瓶。
 
储备液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. NAD 储备液 （100X）：
加入 100 μL H2O放入NAD（组分C）的小瓶中，制成100X NAD储备溶液。
 
2. L-乳酸标准溶液（100 mM）：
加入 200 μL H2O或1x PBS缓冲液放入L-乳酸标准品（组分D）的小瓶中，制成100 mM L-乳酸标准溶液。
 
标准溶液的制备
L-乳酸标准品
 
将 10 μL L-乳酸储备溶液加入 990 μL PBS 缓冲液中，生成 1 mM L-乳酸标准溶液 （Lac7）。取1 mM L-乳酸标准溶液并进行1：3系列稀释，以获得L-乳酸标准品（Lac6 - Lac1）的系列稀释液。注意：稀释的L-乳酸标准溶液不稳定，应在4小时内使用。
 
工作溶液的制备
将 5 mL 检测缓冲液（组分 B）加入一瓶酶探针（组分 A）中。将 50 μL NAD 储备溶液 （100X） 加入组分 A 的瓶中，并充分混合。注意：这种L-乳酸工作溶液不稳定，应及时使用。
 
实验方案样本
表 1.L-乳酸标准品和测试样品在纯黑色96孔微孔板中的布局。Lac= L-乳酸标准品（Lac1 - Lac7，1μM至1 mM），BL=空白对照，TS=测试样品。
 
提单     提单     TS  TS
紫胶1  紫胶1  ...   ...
紫胶2  紫胶2  ...   ...
紫胶3  紫胶3       
紫胶4  紫胶4       
紫胶5  紫胶5       
紫胶6  紫胶6       
紫胶7  紫胶7       
 
表 2.每个孔的试剂组成。
井  卷  试剂
紫胶1 - 紫胶7 50 微升     连续稀释（1 μM 至 1 mM）
提单     50 微升     稀释缓冲液
TS  50 微升     测试样品
 

1. 根据表1和2中提供的布局制备L-乳酸标准品（Lac），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于 384 孔板，每孔使用 25 μL 试剂而不是 50 μL。
2. 向L-乳酸标准品、空白对照和测试样品的每个孔中加入50 μL L-乳酸工作溶液，使L-乳酸测定总体积为100μL/孔。对于 384 孔板，向每个孔中加入 25 μL L-乳酸工作溶液，总体积为 50 μL/孔。
3. 将反应物在室温下孵育30分钟至2小时，避光。
4. 使用荧光板读数器在激发= 530 - 570 nm，发射= 590 - 600 nm（最佳Ex / Em = 540 / 590 nm，在570 nm处截止）监测荧光增加。