产品说明：

分子量 423.42

激发（纳米） 498

发射（纳米） 517

 
活性氧（ROS）是含有氧的化学反应分子。实例包括超氧化物、羟基自由基、单线态氧和过氧化物。由于存在不成对的价壳电子，ROS具有高度反应性。ROS是氧气正常代谢的天然副产物，在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而，在环境压力（例如紫外线或热暴露）期间，ROS水平会急剧增加。这可能会对细胞结构造成严重损害。累积起来，这被称为氧化应激。ROS也是由电离辐射等外源产生的。在氧化应激条件下，ROS的产生急剧增加，导致膜脂质、蛋白质和核酸随后发生改变。这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种病理事件有关，包括动脉粥样硬化、致癌、缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病。ROS Brite™ APF是一种荧光探针，使用常规荧光显微镜，高内涵成像，微孔板荧光测定或流式细胞术测量细胞中的羟基自由基。细胞通透性ROS Brite™ APF试剂是无荧光的，与羟基自由基反应时产生亮绿色荧光。所得荧光可以使用荧光成像、高内涵成像、微孔板荧光测定或流式细胞术进行测量。在过氧化物酶存在下，APF也与过氧化氢反应。与其他ROS相比，APF对羟基自由基具有良好的选择性。APF和HPF对光诱导氧化表现出相对较高的抵抗力。APF 和 HPF 在与羟基自由基或过氧亚硝酸盐阴离子反应之前是无荧光的。APF也会与次氯酸盐阴离子发生反应。
 
平台
荧光显微镜
Excitation        FITC过滤器套件
Emission        FITC过滤器套件
推荐板         黑色墙壁/透明底部
仪器规格        FITC过滤器套件
 
示例协议
 
一目了然
 
储备液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
 
1. ROS 灿灿™ APF 储备溶液：
在 DMSO 中制备 10 至 20 mM 的 ROS™ 灿灿 APF 储备溶液。注意：储备溶液可以储存在-20oC在一次性等分报价中。避光。
 
工作溶液的制备
ROS Brite™ APF工作溶液：
通过将DMSO储备溶液稀释到带有1mMHepes缓冲液（HHBS）的Hanks溶液中，制成10至20μM工作溶液。注意：工作溶液在使用前应新鲜。
 
实验方案样本

1. 用 ROS Brite™ APF （1-10 μM） 在 20°C 下孵育细胞 60 - 37 分钟。
2. 用HHBS缓冲液替换染料上样溶液。
3. 使用适当的荧光仪器在Ex / Em = 490 / 525 mm（截止= 515 nM）下以底部读取模式分析细胞（例如，用于荧光显微镜的FITC滤光片组，用于流式细胞仪的FL1滤光片）。注意：BSA和酚红会影响荧光，应谨慎使用。APF 可用于溶液测定或细胞内测量。