产品说明：

分子量 不适用

激发（纳米） 500

发射（纳米） 582

 
活性氧（ROS）是含有氧的化学反应分子。实例包括超氧化物、羟基自由基、单线态氧和过氧化物。由于存在不成对的价壳电子，ROS具有高度反应性。ROS是氧气正常代谢的天然副产物，在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而，在环境压力（例如紫外线或热暴露）期间，ROS水平会急剧增加。这可能会对细胞结构造成严重损害。累积起来，这被称为氧化应激。MitoROS™ 580是一种超氧化物敏感染料，在加载到活细胞中时定位于线粒体中。MitoROS™ 580被超氧化物氧化产生红色荧光。MitoROS™ 580 可用于使用荧光显微镜或荧光流式细胞仪监测线粒体中的超氧化物。MitoROS™ 580试剂渗透到活细胞中，选择性地靶向线粒体。它被超氧化物迅速氧化。它不太可能被其他活性氧（ROS）和活性氮（RNS）氧化。氧化产物在细胞中具有高荧光。MitoROS™ 580为研究各种病理中的氧化应激提供了有价值的工具。
 
示例协议
 
一目了然
重要说明
此协议仅提供指南，应根据您的特定需求进行修改。在制作MitoROS™ 580工作溶液之前根据需要处理细胞。
 
储备液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
 
1. MitoROS 580 储备溶液 （1000X）将 13 μL DMSO 加入 MitoROS™™ 580 小瓶中并充分混合。
注意：未使用的储备溶液可以储存在-20oC.避光。
 
工作溶液的制备
MitoROS™ 580工作溶液（2X）：
将DMSO储备溶液稀释到具有20 mM Hepes缓冲液（HHBS）的Hanks溶液中，制成2X工作溶液。注意：2X MitoROS™ 580工作溶液不稳定，请及时使用。
 
实验方案样本

1. 根据需要处理细胞。
2. 将细胞（例如100μL/孔在96孔板中）与等体积的2X MitoROS™ 580工作溶液在10°C下孵育30-37分钟，避光。注意：MitoROS™ 580的最终细胞浓度不应超过1 X.浓度超过1 X会产生细胞毒性作用，包括线粒体形态改变以及荧光重新分布到细胞核和细胞质。注意：不同的细胞对MitoROS™ 580的反应不同，相应地调整工作浓度。
3. 轻轻洗涤细胞三次，然后用HHBS缓冲液代替。
4. 使用适当的荧光仪器（例如荧光显微镜，流式细胞仪）分析细胞，Ex / Em = 510 / 580 nm。