产品说明：
细胞内镁对于介导酶促反应、DNA 合成、激素分泌和肌肉收缩很重要。现有的绝大多数镁离子指示剂都是基于三羧酸APTRA螯合剂，该螯合剂来源于流行的四羧酸BAPTA钙离子螯合剂。它们包括mag-fura-2，mag-indo-1，mag-fluo-4和mag-rhod-3。然而，尽管它们被设计用于检测镁离子，但它们对钙的亲和力都高于镁。Mag-520™是第一款对镁的亲和力高于钙的商用镁指示剂。其显著提高的选择性可用于荧光显微镜或流式细胞术的镁信号传导应用。Mag-520™ AM具有与FITC几乎相同的光谱透细胞，使其成为与FITC滤光片组一起使用的方便荧光探针，该滤光片组无处不在，几乎配备了所有荧光仪器。
平台
流式细胞仪
Excitation：488 nm 激光
Emissio：530/30 nm 滤光片
仪器规格：FITC频道
荧光显微镜
Excitation：FITC过滤器套件
Emissio：FITC过滤器套件
推荐板：黑色墙壁/透明底部

1. 根据需要培养细胞
2. 准备Mag-520™ AM工作溶液并将其添加到样品中
3. 将样品在37°C孵育15至45分钟
4. 使用带 530/30 nm 滤光片（FITC通道）的流式细胞仪或使用带有FITC滤光片组的荧光显微镜监测荧光强度

储备溶液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
Mag-520™ AM 库存解决方案
将适量的DMSO加入Mag-520™ AM小瓶中，制成2-5 mM Mag-520™ AM储备溶液。
注意 Mag-520™ AM 工作溶液应及时使用。
工作溶液的制备
Mag-520™ AM 工作解决方案
在您选择的缓冲液中制备5-50μM Mag-520™ AM工作溶液。
注意 Mag-520™ AM 工作溶液应及时使用。
注意 Mag-520™ AM 的浓度应针对不同的细胞类型和条件进行优化。
实验方案样本
以下协议可作为指导，应根据需要进行优化。

1. 根据需要培养细胞。
2. 取出处理并用您选择的缓冲液（如DPBS）洗涤细胞。
3. 加入Mag-520™ AM工作溶液，并将样品在15°C培养箱中孵育45-37分钟。

注意 最佳孵育时间需要仔细确定。

4. 取出工作溶液并用您选择的缓冲液洗涤细胞。
5. 将细胞重悬于您选择的缓冲液中。
6. 添加兴fen剂以刺激细胞，并使用530/30nm滤光片（FITC通道）或带有FITC滤光片组的荧光显微镜使用流式细胞仪监测荧光强度。