产品说明：
三磷酸腺苷（ATP）在细胞能量、代谢调节和细胞信号传导中起着重要作用。它被称为细胞内能量转移的“货币分子单位”，以驱动活细胞中的许多过程和化学合成。ATP还充当细胞通讯的信号分子，并在DNA和RNA合成中发挥重要作用。亚洲空运中心提供多种生物发光检测试剂盒，以重组萤火虫荧光素酶（Cat# 21610 & 21609）测定ATP的纳摩尔（nM）范围。这些试剂盒需要发光酶标仪，经常用于细胞活力或细胞*性测定。PhosphoWorks™ 比色法 ATP 检测试剂盒基于一系列 ATP 诱导的酶偶联反应以产生过氧化*，使用我们的 Amplite® Red 底物在 OD 570 nm 处分光光度法定量。该测定可以在 3 μL 反应体积中检测 ~100 μM 的 ATP，并且来自 ADP 和 AMP 的干扰最小。它为测量生物样品中的ATP水平提供了一种稳定，简单和方便的测定方法。PhosphoWorks™ 比色法 ATP 检测试剂盒是我们基于荧光素酶的 ATP 检测试剂盒的补充。
平台
吸光度酶标仪
吸光度 570 纳米
推荐板 清除底部
组件
组件 A：Amplite ™红色基板（感光）      1瓶
组分B：酶混合物  1瓶（冻干粉）
组分C：检测缓冲液    1 瓶 （5 mL）
组件D：ATP标准 2.8毫克/瓶
构成部分E：DMSO    1 瓶 （100 μL）

1. 制备ATP工作溶液（50μL）
2. 添加 ATP 标准品或测试样品 （50 μL）
3. 在室温下孵育 10 - 30 分钟
4. 监测570nm处的吸光度

重要注意事项：在开始实验之前，在室温下解冻试剂盒组件。
储备液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. Amplite^TM 红色基材储备溶液（200X）：
将 30 μL DMSO（组分 E）加入 Amplite 小瓶中红色基板（组件 A）用于制造 200X Amplite^TM红色基材储备溶液。
2.ATP标准溶液（10 mM）：
将0.5 mL ddH 2 O加入ATP标准品（组分D）的小瓶中，制成10 mM ATP标准溶液。
标准溶液的制备
ATP标准
将 10 μL 10 mM ATP 标准溶液加入 990 μL 1X PBS 缓冲液中，生成 100 μM ATP 标准溶液 （AS7）。取100μM ATP标准溶液（AS7）并进行1：2连续稀释，以获得具有6X PBS缓冲液的连续稀释的ATP标准品（AS1-AS1）。
工作溶液的制备
1. 将 5 mL 检测缓冲液（组分 C）加入酶混合物瓶（组分 B）中，搅拌均匀。
2. 加入 25 μL 200X Amplite^TM将红色底物储备溶液放入酶混合物瓶中，并充分混合制成ATP工作溶液。
实验方案样本
表 1.ATP标准品和测试样品在透明底部96孔微孔板中的布局。AS=ATP标准品（AS1 - AS7，1.56至100μM），BL=空白对照，TS=测试样品。