产品说明:
我们的Cell Explorer™荧光成像试剂盒是一套用于标记细胞的工具,用于细胞功能的荧光显微镜研究。细胞的有效标记为在空间和时间背景下研究细胞事件提供了一种强大的方法。这种特殊的试剂盒旨在用蓝色荧光均匀标记活细胞,用于需要荧光标签分子在细胞内保留相对较长时间的研究。该试剂盒使用带有细胞保留部分的弱荧光染料。染料在进入活细胞时会变成强烈的荧光,并被困在活细胞内,以在相对较长的时间内发出稳定的荧光信号。该染料是一种疏水性化合物,很容易渗透到完整的活细胞中。标签过程非常强大,需要最少的手动操作时间。它可以很容易地适应各种荧光平台,如微孔板测定、免疫细胞化学和流式细胞术。它可用于各种研究,包括细胞粘附、趋化性、多药耐药性、细胞活力、细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒通过优化的细胞标记方案提供所有基本组件。
平台
流式细胞仪
Excitation:350 nm 或 405 nm 激光
Emission:450/40 nm 滤光片
仪器规格:Pacific Blue channel
荧光显微镜
Excitation:DAPI 筛选器
Emission:DAPI 筛选器
推荐板:黑色墙壁/透明底部
组件
组件 A:Track It™ Blue—2瓶
组件B:DMSO—1 瓶 (0.2 mL)
组分C:检测缓冲液—1 瓶 (20 mL)
储备溶液的制备
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
Track It™ 蓝色储备溶液 (2 mM)
将 25 μL DMSO(组分 B)加入一瓶 Track It Blue(组分 A)中,充分混合制成 2 mM Track It™™ Blue 储备溶液。
工作溶液的制备
Track It™蓝色工作解决方案
将 2 mM Track It™ Blue 储备溶液稀释到分析缓冲液(组分 C)中,制成 5 至 50 μM Track It™ Blue 工作溶液。
注意此Track It™ Blue工作溶液应以适当的浓度为100 μL/孔为所有孔制备足够的溶液。例如,要获得一个 20 孔微孔板终浓度为 96 μM 的 Track It™ Blue,请将 10 μL Track It Blue 储备溶液稀释到 1 mL 检测缓冲液(组分 C)中,制成 1 mL 20 μM (1X) Track It™™ Blue 工作溶液。
注意 Track It™ Blue的最终浓度应根据不同细胞类型和/或实验条件的经验确定。建议在至少超过十倍范围的浓度下进行测试。
注意 我们发现,对于大多数细胞系来说,2 μM最终孔浓度就足够了。
实验方案样本
我们的Cell Explorer™荧光成像试剂盒是一套用于标记细胞的工具,用于细胞功能的荧光显微镜研究。细胞的有效标记为在空间和时间背景下研究细胞事件提供了一种强大的方法。这种特殊的试剂盒旨在用蓝色荧光均匀标记活细胞,用于需要荧光标签分子在细胞内保留相对较长时间的研究。该试剂盒使用带有细胞保留部分的弱荧光染料。染料在进入活细胞时会变成强烈的荧光,并被困在活细胞内,以在相对较长的时间内发出稳定的荧光信号。该染料是一种疏水性化合物,很容易渗透到完整的活细胞中。标签过程非常强大,需要最少的手动操作时间。它可以很容易地适应各种荧光平台,如微孔板测定、免疫细胞化学和流式细胞术。它可用于各种研究,包括细胞粘附、趋化性、多药耐药性、细胞活力、细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒通过优化的细胞标记方案提供所有基本组件。
平台
流式细胞仪
Excitation:350 nm 或 405 nm 激光
Emission:450/40 nm 滤光片
仪器规格:Pacific Blue channel
荧光显微镜
Excitation:DAPI 筛选器
Emission:DAPI 筛选器
推荐板:黑色墙壁/透明底部
组件
组件 A:Track It™ Blue—2瓶
组件B:DMSO—1 瓶 (0.2 mL)
组分C:检测缓冲液—1 瓶 (20 mL)
- 准备样品
- 加入 1X Track It™ Blue 工作溶液(100 μL/孔)
- 将细胞在 37°C 下染色 15 至 60 分钟
- 清洗细胞
- 使用DAPI滤光片或带450 nm滤光片的流式细胞仪(太平洋蓝色通道)在荧光显微镜下检查标本
储备溶液的制备
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
Track It™ 蓝色储备溶液 (2 mM)
将 25 μL DMSO(组分 B)加入一瓶 Track It Blue(组分 A)中,充分混合制成 2 mM Track It™™ Blue 储备溶液。
工作溶液的制备
Track It™蓝色工作解决方案
将 2 mM Track It™ Blue 储备溶液稀释到分析缓冲液(组分 C)中,制成 5 至 50 μM Track It™ Blue 工作溶液。
注意此Track It™ Blue工作溶液应以适当的浓度为100 μL/孔为所有孔制备足够的溶液。例如,要获得一个 20 孔微孔板终浓度为 96 μM 的 Track It™ Blue,请将 10 μL Track It Blue 储备溶液稀释到 1 mL 检测缓冲液(组分 C)中,制成 1 mL 20 μM (1X) Track It™™ Blue 工作溶液。
注意 Track It™ Blue的最终浓度应根据不同细胞类型和/或实验条件的经验确定。建议在至少超过十倍范围的浓度下进行测试。
注意 我们发现,对于大多数细胞系来说,2 μM最终孔浓度就足够了。
实验方案样本
- 取出生长培养基,用PBS洗涤细胞一次。
- 向每个孔中加入 100 μL Track It™ Blue 工作溶液 (1X)。
- 将细胞在 37°C、5% CO 2 培养箱中孵育 15 至 60 分钟。
- 用汉克斯和20mMHepes缓冲液(HHBS)或适当的缓冲液洗涤细胞。
- 用检测缓冲液或适当的缓冲液填充细胞孔。
- 使用带有DAPI滤光片的荧光显微镜或带450/40nm滤光片(太平洋蓝通道)的流式细胞仪分析细胞。