产品说明：
激发（纳米）：501
发射（纳米）：510
我们的Cell Navigator®荧光成像试剂盒是一套荧光成像工具，用于标记亚细胞器，如膜、溶酶体、线粒体和细胞核等。活细胞区室的选择性标记为在空间和时间背景下研究细胞事件提供了一种强大的方法。该特定试剂盒旨在用绿色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶酶体染料，该染料选择性地积累在溶酶体中，可能使溶酶体pH梯度小瓶。溶致性指示剂是一种疏水性化合物，很容易渗透到完整的活细胞中，并在进入细胞后被困在溶酶体中。其荧光在进入溶酶体时显着增强。这一关键特征显着提高了其对溶酶体的选择性。标签方案非常强大，需要最少的手动操作时间。它可以很容易地适应各种荧光平台，如微孔板测定、免疫细胞化学和流式细胞术。它可用于各种研究，包括细胞粘附、趋化性、多药耐药性、细胞活力、细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒通过优化的细胞标记方案提供所有基本组件。它适用于增殖和非增殖细胞，可用于悬浮细胞和贴壁细胞。
组件
组分A：LysoBrite™ Green：1 瓶（100 μL-500X DMSO 储备溶液）
组分B：活细胞染色缓冲液：1 瓶 （50 mL）

1. 准备细胞
2. Add LysoBrite™ Green working solution
3. 在 37°C 下孵育 30 分钟至 2 小时
4. 在Ex / Em = 490 / 525 nm的荧光显微镜下分析细胞（FITC滤光片组）

重要说明：在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒成分。
工作溶液的制备
将 20 μL 500X LysoBrite Green 储备溶液（组分 A）加入 10 mL 活细胞染色缓冲液（组分 B）中，制成 LysoBrite™™ Green 工作溶液。避光。注意：20 μL 500X LysoBrite™ Green（组分 A）足以用于一个 96 孔板。荧光溶酶体指示剂的最佳浓度因具体应用而异。染色条件可以根据特定的细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性进行修改。
实验方案样本
对于贴壁细胞：

1. 在 96 孔黑色壁/透明底板（100 μL/孔/96 孔板）或填充有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合度时，加入等体积的LysoBrite™绿色工作溶液。
2. 将细胞在 37°C、5% CO 中孵育₂培养箱30分钟至2小时。
3. 使用带有FITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞（Ex / Em = 490 / 525 nm）。注意：建议增加标记浓度或孵育时间，以便在细胞似乎没有充分染色的情况下让染料积聚。

对于悬浮细胞：

1. 以1000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。
2. 将细胞沉淀轻轻重悬于预热的生长培养基中，然后加入等体积的LysoBrite™ Green工作溶液。
3. 将细胞在 37°C、5% CO 中孵育2培养箱30分钟至2小时。
4. 使用带有FITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞（Ex / Em = 490 / 525 nm）。注意：建议增加标记浓度或孵育时间，以便在细胞似乎没有充分染色的情况下让染料积聚。悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak（BD生物科学）处理并染色为贴壁细胞的盖玻片上。