产品说明：
       有多种参数可用于监测细胞凋亡。该特定试剂盒旨在通过测量还原型 gu胱gan肽（GSH）的降低来检测细胞凋亡。 gu胱gan肽对于维持细胞的氧化还原水平很重要。它参与许多细胞过程，包括清除自由基、药物解毒、细胞信号传导和细胞增殖。细胞GSH浓度的降低是响应许多细胞中不同凋亡刺激的细胞死亡进展的早期标志。我们的细胞计™细胞内GSH检测试剂盒使用我们专有的ThiolTrace™ Violet 500，在与硫醇（包括细胞中的GSH）反应时会发出强烈的荧光。在正常细胞中，探针具有高度荧光，而在凋亡细胞中，染色强度降低。用ThiolTrace™ Violet染色的细胞可以用流式细胞仪（太平洋橙色滤光片组）观察。该试剂盒可与其他试剂（如 7-AAD （#17501） ）一起使用，用于细胞活力和凋亡的多参数研究。该试剂盒针对使用流式细胞仪筛选细胞凋亡激活剂和抑制剂进行了优化。
组件
组分 A：ThiolTrace™ Violet 500—1瓶
组分B：检测缓冲液—1 瓶 （100 mL）
组件C：DMSO—1 瓶 （200 μL）

1. 用密度为 5 × 10 的测试化合物制备细胞⁵至1×10⁶细胞/毫升
2. 准备并添加ThiolTrac^TM紫色500细胞工作溶液
3. 37^oC孵化20 到 30 分钟
4. 读取Ex/Em = 405/525 nm-太平洋橙色滤光片组时的荧光强度

重要注意事项：在开始实验之前在室温下解冻。
储备液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
ThiolTrac^TM紫色 500 储备溶液 （500X）：
将 200 μL DMSO（组分 C）加入到巯基痕量小瓶中ThiolTrac^TM紫罗兰色500，搅拌均匀。注意：等分并存储未使用的ThiolTrac^TM紫罗兰色 500 储备溶液在 -20^oC.避免反复冻融循环。
工作溶液的制备
ThiolTrac^TM紫罗兰500工作溶液（1X）：
加入 2 μL ThiolTrac^TM紫色 500 储备溶液到 1 mL 检测缓冲液（组分 B）或您选择的缓冲液中，并充分混合。注意： ThiolTrac^TM紫罗兰500 工作溶液可以在含有血清的细胞培养基中制备。
实验方案样本

1. 用测试化合物处理细胞所需的时间。注意：对于贴壁细胞，用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在用ThiolTrace™ Violet工作溶液孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。
2. 以 1000 rpm 离心细胞 4 分钟，然后在您选择的 1 mL 缓冲液中洗涤细胞（可选）。
3. 将细胞重悬于 1 mL ThiolTrac^TM紫罗兰500工作溶液并在37时孵育oC 培养箱 20 至 30 分钟。
4. 使用太平洋橙色滤光片组（Ex / Em = 405 / 525 nm）的流式细胞仪监测荧光强度。对感兴趣的细胞进行门控，不包括碎片。