产品说明：
膜联蛋白V可与包括APC在内的荧光染料偶联。这种形式保留了其对磷脂酰丝an酸（PS）的高亲和力，因此可作为正在经历细胞凋亡的细胞流式细胞术分析的灵敏探针。由于PS的外化发生在细胞凋亡的早期阶段，APC膜联蛋白V染色可以在比基于核变化（如DNA片段化）的测定更早的阶段识别细胞凋亡。APC膜联蛋白V染色先于膜完整性的丧失，膜完整性的丧失伴随着由凋亡或坏死过程引起的细胞死亡的最新阶段。因此，用APC膜联蛋白V染色通常与重要染料（如碘化丙啶（PI）或7-氨基放线菌素（7-AAD））结合使用，以使研究人员能够识别早期凋亡细胞。
组件
组分A：APC-膜联蛋白V偶联物—1瓶
组分B：测定缓冲液（4°C）—1 瓶 （50 mL）
组分C：100X碘化丙啶—1 瓶 （100 μL）

1. 用测试化合物制备细胞（200 μL/样品）
2. 添加APC-膜联蛋白V检测溶液
3. 在室温下孵育 20 - 60 分钟
4. 使用带有 660/20 nm 滤光片的流式细胞仪分析细胞（APC 通道）

重要说明：在开始实验之前，在室温下解冻100X碘化丙啶（组分C）。
储备液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. APC-膜联蛋白V储备溶液（100X）：将200 μL PBS和0.2%BSA加入APC-膜联蛋白V偶联物（组分A）的小瓶中，充分混合制成100X APC-膜联蛋白V储备溶液。
注意：将重组的100X APC-膜联蛋白V储备溶液储存在4^oC. 不要冻结。
实验方案样本

1. 用测试化合物处理细胞一段时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞为4-6小时）以诱导细胞凋亡。注意：贴壁细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析不常规测试，因为在细胞分离或收获过程中可能发生特定的膜损伤。然而，利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法先前已由Casiola-Rosen等人和van Engelend等人报道。
2. 离心细胞得到1-5×10⁵细胞/管。
3. 将细胞重悬于 200 μL 检测缓冲液（组分 B）中。
4. 向细胞中加入 2 μL 100X APC-膜联蛋白 V 储备溶液。
5. 自选：将 2 μL 100X 碘化丙啶（组分 C）加入坏死细胞细胞中。
6. 在室温下孵育 20 至 60 分钟，避光。
7. 自选：在用流式细胞仪分析细胞之前，加入 200 至 300 μL 测定缓冲液（组分 B）以增加体积。
8. 使用带有660/20nm滤光片（APC通道）的流式细胞仪监测APC-膜联蛋白V的荧光强度。当将碘化丙啶添加到细胞中时，使用 610/20 nm 滤光片（PE- Texas Red channel）测量细胞活力。