产品说明：
我们的细胞计™ FITC-膜联蛋白V结合检测试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝an酸（PS）的易位来监测细胞凋亡。在细胞凋亡中，PS被转移到质膜的外小叶上。磷脂酰丝an酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的通用指标，可以在观察到形态变化之前检测到。该试剂盒使用绿色荧光FITC-膜联蛋白V偶联物，可特异性结合PS。FITC-膜联蛋白V偶联物已被证明可以选择性结合PS。该检测试剂盒经过优化，可使用具有 488 nm 激光和 530/30 nm 发射滤光片（FITC通道）的流式细胞仪监测细胞凋亡。
组件
组分A：膜联蛋白V-FITC（100X储备溶液）   1 瓶（200 μL/瓶）
组分B：测定缓冲液（4°C）    1 瓶 （50 mL）
组分C：100X碘化丙啶     1 瓶 （100 μL）

1. 用测试化合物制备细胞（200 μL/样品）
2. 添加膜联蛋白V-FITC检测溶液
3. 在室温下孵育 30 - 60 分钟
4. 使用FL1通道（Ex / Em = 490 / 525 nm）的流式细胞仪分析细胞

重要说明：在开始实验之前，在室温下解冻100X碘化丙啶（组分C）。
实验方案样本

1. 用测试化合物处理细胞所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞为4-6小时）以诱导细胞凋亡。注意：贴壁细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析不常规测试，因为在细胞分离或收获过程中可能发生特定的膜损伤。然而，利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法先前已由Casiola-Rosen等人和van Engelend等人报道。
2. 离心细胞得到 2 - 5 × 10⁵细胞/管。
3. 将细胞重悬于 200 μL 检测缓冲液（组分 B）中。
4. 向细胞中加入 2 μL 膜联蛋白 V-FITC（组分 A）。
5. 自选：加入 2 μL 100X 碘化丙啶（组分 C）用于坏死细胞。
6. 在室温下孵育 30 至 60 分钟，避光。
7. 自选：在用流式细胞仪分析细胞之前，加入 200 至 300 μL 测定缓冲液（组分 B）以增加体积。
8. 使用具有FL1通道（Ex / Em = 490 / 525 nm）的流式细胞仪监测膜联蛋白V-FITC的荧光强度。当将碘化丙啶添加到细胞中时，使用FL2通道测量细胞活力。