产品说明：

激发（纳米） 542

发射（纳米） 580

 
细胞周期有四个连续的阶段：G0/G1、S、G2 和 M。在细胞通过细胞周期的过程中，其DNA在S（合成）阶段复制，并在M（有丝分裂）阶段平均分布在两个子细胞之间。这两个阶段由两个间隙阶段隔开：G0/G1 和 G2。这两个间隙阶段为细胞生长提供了时间，并使蛋白质和细胞器的质量翻倍。细胞也使用它们来监测内部和外部条件，然后再进行细胞周期的下一阶段。细胞通过细胞周期的通道由许多不同的调节蛋白控制。该检测试剂盒旨在通过在活细胞中使用我们专有的核红™ CCS2来监测细胞周期进程和增殖。给定样品中处于G0 / G1，S和G2 / M期的细胞百分比，以及细胞凋亡前处于亚G1期的细胞百分比可以通过流式细胞术确定。用核红™ CCS2染色的细胞可以用流式细胞仪（PE- Texas Red channel）监测。
 
组件
组件A：500X核红CCS2™ 1 瓶 （100 μL）
组分B：检测缓冲液         1 瓶 （50 mL）
 
示例协议
 
一目了然
协议摘要
 

1. 用密度为 5 × 10 的测试化合物制备细胞⁵至 1× 10⁶细胞/毫升
2. 将 1 μL 500X 核红™ CCS2 加入 0.5 mL 细胞溶液中
3. 在37°C，5%CO下孵育₂10 - 30 分钟
4. 使用具有PE- Texas Red channel的流式细胞仪分析细胞（Ex / Em = 488 nm / 615 nm）

 
重要事项 在开始实验之前，在室温下解冻所有组分。
 
实验方案样本

1. 对于每个样品，在 0.5 mL 温热培养基或您选择的缓冲液中制备细胞，密度为 5×105至 1×106细胞/毫升。注意：应单独评估每个细胞系，以确定最佳细胞密度。
2. 用测试化合物处理细胞一段时间，以诱导细胞凋亡，细胞周期停滞或其他细胞周期功能。
3. 在含有生长培养基的细胞中加入 1 μL 500X 核红™ CCS2（组分 A）。
4. 将细胞在37°C，5%CO中孵育2培养箱10至30分钟。注意：对于贴壁细胞，用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在用核红™ CCS2孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。染色前无需固定细胞，因为核红™ CCS2是细胞渗透的。
5. 自选：以 1000 rpm 离心细胞 4 分钟，然后将细胞重悬于 0.5 mL 测定缓冲液（组分 B）或您选择的缓冲液中。
6. 使用具有PE-Texas Red channel（Ex / Em = 488 / 615 nm）的流式细胞仪监测荧光强度。门控感兴趣的细胞，不包括碎片。