产品说明：
细胞计™细胞粘附检测试剂盒是一种快速灵敏的检测试剂盒，用于测量各种细胞类型的细胞间或细胞表面粘附性。在该测定中，细胞用钙黄绿AM标记并使其粘附。去除非贴壁细胞后，使用钙黄绿超绿的荧光来计算贴壁细胞的数量。使用我们出色的荧光染料Calcein UltraGreen AM提供了一种快速灵敏的方法来测量细胞与各种细胞类型的粘附。钙黄绿AM是非荧光的，但一旦加载到细胞中，就会被内源性酯酶切割以产生高荧光钙黄绿，这是一种明亮的荧光，pH依赖性的细胞质细胞标志物，对细胞粘附过程的干扰最小。细胞计™细胞粘附测定设计用于荧光酶标仪。钙黄绿增材制造的强大性能和试剂盒的简单程序避免了与利用放射性同位素（产生危险废物）的测定以及依赖于使用共价偶联细胞表面标记的测定相关的问题，这可能会改变细胞功能。
平台
荧光显微镜
兴奋：FITC有机硅滤光片套件
排放：FITC有机硅滤光片套件
推荐盘子：黑色墙壁/透明底部
荧光酶标仪
兴奋：490海里
排放：525海里
近路：515海里
推荐盘子：黑色墙壁/透明底部
组件
组分A：钙黄绿素UltraGreen™ AM——1 瓶
组分 B：粘附测定缓冲液——1 瓶 （25 mL）
组件 C：DMSO——1 瓶 （100 μL）
协议摘要
在涂有所需涂层材料的板上添加细胞
在37°C孵育细胞以使其附着
删除未附加的单元格
添加钙黄绿素增材制造工作溶液
将细胞在37°C孵育20-30分钟
除去上清液并用HHBS或DPBS洗涤细胞
使用Ex / Em = 490 / 525nm的荧光酶标仪测量荧光强度
重要
在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。
储备溶液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免重复冻融循环。
钙黄绿素Ultragreen AM储备液
将 50 μL DMSO（组分 C）加入 Calcein Ultragreen AM（组分 A）中并充分混合。
注意：将未使用的钙黄绿素Ultragreen AM储备溶液在-20°C下以一次性等分试样储存，以避免冻融循环。
工作溶液的制备
钙黄绿素增材制造工作溶液
将 50 μL 钙黄绿素 Ultragreen AM 储备溶液加入 10 mL 粘附测定缓冲液中并充分混合。
注意：钙黄绿素Ultragreen AM工作溶液不应储存，应及时使用。
注意：10 mL 钙绿增材制造工作溶液足以进行 100 次测试。
实验方案样本
以下协议可作为指导，应根据需要进行优化。
在涂有所需包衣材料的平板上加入 100 μL 体积的细胞。
将板在37°C孵育2至3小时。
注意：对于每个细胞系，应通过实验测试最佳孵育时间。
去除生长培养基和未附着的细胞。
加入100μL钙绿素AM工作溶液，并将板在37°C孵育20-30分钟。
注意：对于每个细胞系，应通过实验测试最佳孵育时间。
除去染料工作溶液，用 1X Hank 盐溶液和 20 mM Hepes 缓冲液或 DPBS 洗涤细胞一次。
向孔中加入 100 μL 粘附测定缓冲液。
使用荧光酶标仪在 Ex/Em = 490/525 nm（截止 = 515 nm）处监测荧光强度。
细胞计™细胞粘附检测试剂盒是一种快速灵敏的检测试剂盒，用于测量各种细胞类型的细胞间或细胞表面粘附性。在该测定中，细胞用钙黄绿AM标记并使其粘附。去除非贴壁细胞后，使用钙黄绿超绿的荧光来计算贴壁细胞的数量。使用我们出色的荧光染料Calcein UltraGreen AM提供了一种快速灵敏的方法来测量细胞与各种细胞类型的粘附。钙黄绿AM是非荧光的，但一旦加载到细胞中，就会被内源性酯酶切割以产生高荧光钙黄绿，这是一种明亮的荧光，pH依赖性的细胞质细胞标志物，对细胞粘附过程的干扰最小。细胞计™细胞粘附测定设计用于荧光酶标仪。钙黄绿增材制造的强大性能和试剂盒的简单程序避免了与利用放射性同位素（产生危险废物）的测定以及依赖于使用共价偶联细胞表面标记的测定相关的问题，这可能会改变细胞功能。
平台
荧光显微镜
兴奋：FITC有机硅滤光片套件
排放：FITC有机硅滤光片套件
推荐盘子：黑色墙壁/透明底部
荧光酶标仪
兴奋：490海里
排放：525海里
近路：515海里
推荐盘子：黑色墙壁/透明底部
组件
组分A：钙黄绿素UltraGreen™ AM——1 瓶
组分 B：粘附测定缓冲液——1 瓶 （25 mL）
组件 C：DMSO——1 瓶 （100 μL）
协议摘要
在涂有所需涂层材料的板上添加细胞
在37°C孵育细胞以使其附着
删除未附加的单元格
添加钙黄绿素增材制造工作溶液
将细胞在37°C孵育20-30分钟
除去上清液并用HHBS或DPBS洗涤细胞
使用Ex / Em = 490 / 525nm的荧光酶标仪测量荧光强度
重要
在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。
储备溶液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免重复冻融循环。
钙黄绿素Ultragreen AM储备液
将 50 μL DMSO（组分 C）加入 Calcein Ultragreen AM（组分 A）中并充分混合。
注意：将未使用的钙黄绿素Ultragreen AM储备溶液在-20°C下以一次性等分试样储存，以避免冻融循环。
工作溶液的制备
钙黄绿素增材制造工作溶液
将 50 μL 钙黄绿素 Ultragreen AM 储备溶液加入 10 mL 粘附测定缓冲液中并充分混合。
注意：钙黄绿素Ultragreen AM工作溶液不应储存，应及时使用。
注意：10 mL 钙绿增材制造工作溶液足以进行 100 次测试。
实验方案样本
以下协议可作为指导，应根据需要进行优化。
在涂有所需包衣材料的平板上加入 100 μL 体积的细胞。
将板在37°C孵育2至3小时。
注意：对于每个细胞系，应通过实验测试最佳孵育时间。
去除生长培养基和未附着的细胞。
加入100μL钙绿素AM工作溶液，并将板在37°C孵育20-30分钟。
注意：对于每个细胞系，应通过实验测试最佳孵育时间。
除去染料工作溶液，用 1X Hank 盐溶液和 20 mM Hepes 缓冲液或 DPBS 洗涤细胞一次。
向孔中加入 100 μL 粘附测定缓冲液。
使用荧光酶标仪在 Ex/Em = 490/525 nm（截止 = 515 nm）处监测荧光强度。