RNase-Free DNase Set

DNase I 膜上消化试剂盒（RNase free）

目录号：91314

产品内容

产品简介

本产品兼容所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒，用来去除基因组DNA。

任何总RNA提取试剂盒都无法完全避免DNA的微量残留，GeneBetter 的RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和特殊硅胶吸附膜，可以去除绝大多数的DNA污染，所以一般不用进行DNase I消化。但是对于一些敏感的下游实验，需要去除微量的DNA残留，可以购买本公司DNase I膜上消化试剂盒（RNase free），直接在离心柱的吸附膜上面消化残留的DNA，然后经过漂洗、洗脱，得到纯净的RNA。

注意事项：

DNase Buffer含Mn2+，可能有轻度发黄发黑，甚至黑色沉淀为正常现象，颠倒混匀后正常使用即可。

DNase是非常敏感，易物理损坏变性丧失活性，所以不要漩涡混匀DNase I和工作液。轻轻吹打或者上下颠倒混匀混合液。每次在抽提RNA抽提前配置新鲜的工作液。

操作步骤

第一次使用前请先在漂洗液 RW 中加入指定量无水乙醇，详见瓶身的标签。

提示：所有离心步骤必须在室温（15~25℃）下进行。

1. 按照正常RNA提取步骤操作，裂解混合物加入RNA吸附柱并离心后（RNA包括残留DNA被吸附到离心柱硅胶膜上），在加入去蛋白液RW1

步骤之前，按照以下步骤操作。

2. DNase I工作液配制：取45μl DNase Buffer和5μl DNase I至新的RNase-Free离心管中，轻轻吹打混匀。（处理多个样品，按照比例放大）

注意：如果残留DNA过多导致消化不完全，可按比例加大使用酶量来提高消化效果（如 90μl DNase I buffer 和 10μl RNase free DNase I）。

3. 加入350μl去蛋白液RW1，室温放置1min，13,000 rpm 离心30sec，倒弃滤液。

4. 向RNA吸附膜的中央加入50μl的DNase I工作液，室温放置15min。

5. 加入350μl 去蛋白液RW1，13,000 rpm离心30sec，倒弃滤液。

6. 下接“加入500μl 漂洗液 RW”步骤等后续步骤。如果是其它公司的试剂盒，则接最后的一个漂洗液漂洗等后续步骤。

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