RNA 长期保存液

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产品内容：

保存温度：

4℃保存，有效期 12 个月。

产品简介：

RNA性质不稳定，极易降解。溶解于无RNase 的TE 或水中的纯化RNA，即便是储存于-20 ºC也难免降解。为解决这一问题，可以将RNA 沉淀或RNA溶液溶解于RNA 长期保存液中，可以允许RNA在4 ºC 过夜或-20 ºC 保存至少1 年而免于降解。RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择。需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA，或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot。

注意事项：

1.     RNA长期保存液可能抑制逆转录酶活性，做逆转录反应之前，应该用乙醇沉淀RNA。

2.      在RNA 长期保存液中的RNA 的终浓度不应该超过4μg /μl。

使用方法：

一、用RNA长期保存液溶解RNA沉淀

1.     对固体RNA 沉淀，每0.4-4μg RNA 沉淀加入1μl RNA长期保存液，反复吹打混匀或者室温振荡15-30 分钟溶解沉淀。干燥的RNA沉淀难以溶解，可反复吹打混匀后50 ºC 加热10-15 分钟。最好先用小体积无 RNase 的TE 或水溶解RNA 沉淀，然后按液态RNA 操作。

2.对液态RNA 溶液，每0.4-4μg RNA 溶液加入1μl RNA 长期保存液，混匀。注意混合液中RNA 长期保存液的体积百分比不低于80%。

3.    测定OD 值。注意加入相应量的RNA 长期保存液做空白。

4.    将溶解的RNA 样品储存于-20 ºC或者-70 ºC。

二、从RNA长期保存液中沉淀RNA

1.  估计 RNA 溶液终体积。加入 4 倍体积的无水乙醇，混匀。如果溶液体积过小操作不便，可加入 RNase free water 稀释 RNA 溶液,如果溶液中 RNA 含量低于 0.25μg /μl，可加入 5M NaCl(RNase free) 至终浓度 0.2M,混匀，然后再加入 4 倍体积乙醇。

2.室温放置 5 分钟。

3.     12,000 rpm 5 min。弃上清。风干，溶解。

4.     重新沉淀的RNA 溶解后可用于 RT-PCR 反应。也可用于任何其他实验。

三、直接使用RNA长期保存液中的RNA

直接吸取RNA长期保存液中的RNA ， 进行普通或甲醛变性电泳和 Northern Blot。进行甲醛变性电泳时，最后上样的样品中的RNA长期保存液的浓度可高达50%。

附：甲醛变性电泳样品准备： 临用前，混合水（87μl），甲醛（81μl）, 50%甘油/含0.25 mg/ml溴芬兰(48μl) 和20X MOPS (24 μl). 将上述混合液和RNA长期保存液中的RNA样品等体积混合，55 ºC温育10分钟，按照标准的甲醛变性电泳过程上样。每1ml 裂解液（裂解液RL、裂解液 RLS、裂解液PRL、裂解液ARL Plus）