RNAsafe 无液氮 RNA 样品保存液

 

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产品内容

产品简介

RNAsafe 是一种水相的，无毒的组织保存液体，可以迅速渗入新鲜组织细胞的胞浆中，在非冻状态下原位稳定和保护细胞内的RNA。适用于动物组织（心，肝，肾，肌肉，睾丸，脑，脾等）、培养细胞、RNA 病毒、果蝇、细菌、白细胞、全血、一些植物组织等。

特别适合野外和临床采集样本，无需携带液氮，浸入RNAsafe后，新鲜组织细胞中RNA可以完好地在37℃下保存一天, 在25℃下保存一周, 4℃下保存一个月, 在-20℃或-80℃下长期保存。RNA 病毒样品(如HCV 和HIV)可在37℃保存一个月。

产品特点

操作容易：将组织剪成适当大小，浸没在RNAsafe中即可使其RNA不被降解。

无需液氮：使样品的保存不需液氮干冰或-80℃冰箱 尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。

方便运输：处理过的样品能在25℃保存一周，使样品邮寄和运输变得容易。

多次冻融: 经RNAsafe处理的样品可反复冻融多次，不影响提取的RNA 质量。

可比性强: 能减少重复实验中的误差，对大规模基因表达谱的分析尤其有用。

兼容性广: 多种总RNA提取试剂都可以用来提取保存在RNAsafe内的样品。还可直接用于组织切片免疫学和流式细胞分析而不影响RNA提取的质量。

一、如何使用RNAsafe：

RNAsafe只用于新鲜组织，浸泡入RNAsafe前禁止冷冻组织。只需要迅速将新鲜组织剪成长，宽，高任意一边厚度<0.5厘米浸泡入RNAsafe即可（只要有一边厚度不超过0.5厘米，RNAsafe可以迅速渗透，其它两边的尺寸并不重要）。将新鲜组织浸泡在5倍体积的RNAsafe中，按要求存放在适当的温度。

1. 动物组织

RNAsafe并不破坏或者溶解组织结构，因此浸泡在RNAsafe中达到渗透平衡的组织可以从RNAsafe中取出，然后切成更小的块，然后放回到RNAsafe中下次继续使用。小器官如小鼠肝，肾，和脾不需要剪切，可以完整的存放在RNAsafe中。

2. 植物组织

很多植物组织直接浸泡入RNAsafe即可，有的植物有天然渗透屏障如腊质保护层，需要先破坏掉腊质层，便于RNAsafe渗透。

3. 组织培养细胞

细胞吹打下来后，离心收集细胞,弃上清，用冰浴的PBS缓冲液洗一次去除残留培养液。将细胞悬浮在少量PBS缓冲液中。加入五到十倍体积RNAsafe, 混均。

4. 血和血浆

和红细胞和血清分离的白细胞可以和组织培养细胞一样的保存。RNAsafe也可以保存抗凝全血，血清和血浆。对于全血加入3倍体积RNAsafe，混匀。

5. 酵母

离心收集3X108的细胞（>12，000g离心两分钟），立刻将细胞团重悬在0.5~1 ml 的RNAsafe中。酵母细胞可以保存在RNAsafe中25℃8小时或者4℃一个星期。如果要保存存更长时间，将酵母细胞在RNAsafe中放置一个小时后， 再次于>12,000g离心5分钟，将酵母细胞团放入液氮瞬时冷冻后放置于–80℃储存。

6. 细菌

细菌并不能在RNAsafe 中生长，但是RNAsafe并不破坏细菌，E. coli在4℃ 保存一个月仍旧可以提出完整的RNA。

二、RNAsafe中样本的存放：

1. 存放在–80℃

文档样品长期保存用。将RNAsafe中样本放置于4℃过夜，然后将样本捞出，尽量去除干净RNAsafe液体，然后放置于–80℃. 对于组织培养细胞，则不需要去除RNAsafe，直接冷冻于–80℃，并不会裂解细胞。样品使用时可以在室温融化，并且还可以再次冷冻而不影响RNA的完整性和产量。

2. 存放在–20℃

将RNAsafe中样本放置于4℃过夜，然后转移到–20℃。在–20℃样品并不会被冰冻，但是可能会形成一些结晶，这并不会影响将来的RNA提取。样品使用时可以在室温融化，并且还可以再次冷冻而不影响RNA的完整性和产量。

3. 存放在4℃

样本可以在4℃存放一个月。

4. 存放于25℃

存放于25℃样本的RNA在一周内保持完整，保存两周的样品RNA有轻微降解，勉强能用于northern analysis, 但是质量足够用于nuclease protection assay or RT-PCR analysis。

5. 存放于37℃

存放于37℃样本的RNA在24小时内保持完整，3天的时候有部分降解。

三、RNAsafe 保存样本的 RNA 提取：

将样本从RNAsafe中取出，RNAsafe可以直接倒入水池，用自来水冲洗即可，不需特殊处理。

1. 组织

需要用干净镊子将样本从RNAsafe中捞出，用吸水纸稍稍吸去残留的RNAsafe后，可以和新鲜组织一样按照液氮研磨，然后匀浆处理的标准程序进行提取RNA。

2. 细胞

对于储存在RNAsafe中的细胞有两种选择。一是去除RNAsafe后提取RNA, 另一个是直接从细胞和RNAsafe的混合物提取。

a. 去除 RNAsafe 后提取 RNA

存放于RNAsafe中的细胞变得不那么脆弱，可以承受较高的离心速度而不被裂解。我们有在5000g离心成功收集细胞的经验，由于每种细胞的强度不一样， 可以先用不重要的细胞做个预试验，以保证在使用的速度下离心不会破坏细胞。另一个选择是在离心前加等体积的

PBS稀释RNAsafe和细胞的混合物，以减少溶液的密度，使细胞溶液可以沉淀下来。

b. 不去除 RNAsafe，直接提取 RNA

也可以直接加10倍体积的一步法提取试剂（如RNAzol，Trizol reagent）到细胞和RNAsafe的混合物，然后按照正常步骤操作。

 

 

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