RNA 酶抑制剂
RNase Inhibitor
目录号：91315
产品内容
|
产品成份 |
保存 |
91315-2000 |
|
RNase Inhibitor |
-20℃ |
50 μl（40U/μl） |
产品简介
本制品是经过大肠杆菌表达的重组蛋白，与RNase A形成1：1复合体，对RNase 表现高度的非竞争性抑制（Ki=3×10-10 M）。该反应是可逆的，通过尿素及疏基类试剂能够解离复合体，使RNase 复活而抑制剂不可逆失活。
本品属蛋白质性质，与其它竞争性抑制剂（核酸类、无机磷酸类）不同，可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去。
活性定义：
抑制5ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。
注意事项：
－20 ℃保存，避免起泡，避免剧烈振荡或搅拌。
使用方法：
第一链cDNA合成(以20 μl反应体系为例)
1、加入
|
Components |
Volume |
|
Total RNA/mRNA |
50 ng-5 μg / 5-500 ng |
|
Oligo(dT)18(0.5 μg /μl)or Random Primer(0.1 μg/μl) or GSP(Gene Specific Primer) dNTP Mixture (10 mM each) |
1 μl |
|
1 μl |
|
|
2 pmol 1 μl |
|
|
5× RT Buffer |
4 μl |
|
RNase Inhibitor(40 units/μl) |
0.5~1 μl |
|
TUREscript Hˉ RTase |
1 μl |
|
RNase free H2O to final volume |
20 μl |
2、轻轻混匀
如用 Oligo(dT)18 或基因特异引物(GSP)，42℃孵育 50min。
如用 Random Primer，25℃孵育 10 min，42℃孵育 50 min。
3、85℃加热 5 min 失活 RTase。
4、PCR / qPCR: cDNA 可直接用于 PCR 反应或储存于-20°C。
