FlashPure Plus RNA Purification Kit

增强型 RNA 清洁纯化试剂盒（含 miRNA）

目录号:91612

产品内容：

自备试剂：

无水乙醇

保存条件：

室温（15 ~ 25℃）

产品简介：

本试剂盒不但可以纯化大片段的 mRNA 等 RNA，也可以纯化 miRNA 等各种小的 RNA。适用于从酶反应液（如DNase 处理、体外转录、RNA 加帽、蛋白酶处理、RNA 标记等）中纯化回收RNA，也可用于从其它方式提取获得的 RNA 的纯化。

在高盐条件下，RNA 与硅胶吸附膜高效、专一地结合，经过漂洗步骤，最大限度除去蛋白质、无机盐离子和许多有机杂质等，在低盐条件下，RNA 被洗脱。可处理的RNA 样品量可高达 100 μg。

本试剂盒纯化的RNA 没有蛋白的污染，所得的 RNA 可用于NGS RNA 文库构建、反转录荧光定量 PCR、 Northern blot、 Formation of ribonucleoprotein (RNP) complexes for genome editing、显微注射、RNA 标记、 RNA 干扰、转染等下游实验。

适用范围：

适用于回收≥15nt 的单链 RNA 或者双链RNA。

产品特点

1.         快速：步骤少，操作简便，整个操作仅需 15 分钟。

2.         高效：独特配方使本产品比一般试剂盒回收效率大大提高，并且不会抑制下游反应。

注意事项

1.   使用前请检查Buffer MRC 是否出现浑浊，如有混浊现象，可在 37℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。

2.所有步骤均可以在室温进行，但是应该迅速操作，减少RNA 降解机会。

3. Wash Solution 1 和 Wash Solution 2/3 加入无水乙醇后，可以在常温保存。

4.  Wash Solution 2/3 可能加入乙醇使用几天后出现沉淀晶体，并不影响使用，直接 不吸晶体，吸上清使用就可以。

操作步骤

提示：

第一次使用前请先在 Wash Solution 1 瓶和 Wash Solution 2/3 瓶中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签，并打对勾标记。

1.    于冰上，用 RNase-Free H2O 将 RNA 样品补足至 100 μl，加入 200 μl Buffer MRC，轻柔混匀。

2.   加入 375 μl （1.25 倍体积）无水乙醇，混匀，无需离心。

注意：如果希望回收大于 25nt 的 RNA，加 1.25 倍体积无水乙醇就可以；如果希望回收大于 15nt 的 RNA，可以加 2 倍体积无水乙醇。

3.    将上一步所得溶液加入一套吸附柱中（吸附柱套在收集管内），13,000 rpm 离心 30 sec，弃滤液，将吸附

柱重新套回收集管。（吸附柱的最大容量是 700 ul，溶液较多时，可分两次进行）

4.    加入 700 μl Wash Solution 1（请先检查是否已加入无水乙醇!），13,000 rpm 离心 30 sec，弃滤液。

5.    漂洗：加入 500ul Wash Solution 2/3，13,000 rpm 离心 30 sec，弃滤液。

6.    二次漂洗：重复步骤 5 一次。

7.    干燥：将离心吸附柱于 13,000 rpm 离心 2 min，甩干残留漂洗液。

8. 洗脱：将吸附柱置于一个新的 1.5 ml 离心管中，在吸附膜的中央悬空滴加 30 ~ 80 μl RNase-Free H2O，室温放置 2 min，13,000 rpm 离心 1 min，收集 RNA 片段。

（注意：为增加回收效率，可将 RNase-Free H2O 在 80℃预热，也可将得到的溶液重新加入到离心管中，室温放置 2 min，再次离心收集。

）