2× Taq PCR Master Mix(含染料)
目录号:71019
产品内容
产品成份 |
71019-05 |
71019-0100 |
2× Taq PCR Master Mix |
5× 1 m |
100× 1 m |
保存条件
-20℃保存,有效期 2 年。经常使用,可置于 4 °C 保存,有效期 3 个月。
产品简介
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。使用时只需加入模板、引物,并用ddH2O补足体积,使Taq Mix终浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。
PCR产物3’端带A头,纯化后可直接用于TA载体克隆(Cat#V114)。
本产品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、测序等后续操作。
适用范围:
1. 基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测,半定量 PCR 实验和微量 DNA 的检测。
2. 对于高 GC 模板和特殊结构的复杂模板有良好效果。
2 × Taq PCR Master Mix 使用说明:
一、配制 PCR 反应体系:(于冰上配制)
Component |
20μl Reaction |
50 μl Reaction |
FinalConcentration |
2× Taq PCR Master Mix |
10 μl |
25 μ |
1 × |
Forward Primer (10 μM |
0.4 μ |
1 μ |
0.2 μM |
Reverse Primer (10 μM) |
0.4 μ |
1 μl |
0.2 μM |
Template DNA |
as required |
as required |
10pg-1μg |
ddH2O |
up to 20 μ |
up to 50 μ |
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参考模板用量(50 μl 反应体系):
质粒:0.1-10 ng;细菌基因组:10-100 ng;人类基因组:50-150 ng;cDNA:1-5 μl 。
二、设置 PCR 循环条件:(请根据实际情况适当调整)
Step |
Temperature |
Time |
Cycle Number |
Initial denaturation |
94℃ |
3 minutes |
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Denaturation |
94℃ |
30 seconds |
30-35 cycles |
Annealing |
55℃ |
30 seconds |
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Extension |
72℃ |
1-2 kb / minute |
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Final Extension |
72℃ |
5 minutes |
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4-8℃ |
Hold |
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三、结果检测:反应结束后取 5 µl 反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。