2× HotMaster Taq PCR Master Mix(含染料)
目录号:71113
产品内容
产品成份 |
71113-05 |
71113-0100 |
2× HotMaster Taq PCR Master Mix |
5x 1ml |
100x 1m |
保存条件
-20℃保存,有效期 2 年。
经常使用,可置于 4 °C 保存,有效期 3 个月。
产品简介
本产品包含HotMaster Taq DNA Polymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×,采用了国际上最新专利的合成亲和性配体技术,该配体可以以一种温度依赖性的方式来可逆性地阻断酶的活性。温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR 扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了PCR 反应的精确性。
适用于扩增各种小于6Kb的DNA模板!PCR产物3’端带A头,纯化后可直接用于TA载体克隆(Cat#V114-20)。
本产品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、测序等后续操作。
产品特点
1. 高产:产量是普通 Taq 酶的 2 倍!
2. 高效:延伸速度 5-10s/kb,一般 0.5 小时完成 PCR!
3. 高成功率:对于高 GC 模板和特殊结构的复杂模板有良好效果!
使用说明:
一、配制 PCR 反应体系:(于冰上配制)
Component |
20 μl Reaction |
50 μl Reaction |
终浓度 |
2×HotMaster Taq PCR Mix |
10 μl |
25 μl |
1 × |
Forward Primer (10 μM) |
0.4 μl |
1 μ |
0.2 μM |
Reverse Primer (10 μM) |
0.4 μl |
1 μ |
0.2 μM |
Template DNA |
as required |
as required |
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ddH2O |
up to 20 μ |
up to 50 μ |
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参考模板用量(50 μl 反应体系):
质粒:0.1-10 ng;细菌基因组:10-100 ng;人类基因组:50-150 ng;cDNA:1-5μl 。
二、建议 PCR 循环条件:
Step |
Temperature |
Time |
Cycle Number |
Initialdenaturation |
94℃ |
5 minutes |
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Denaturation |
94℃ |
10 seconds |
30-35 cycles |
Annealing |
55℃ |
15 seconds |
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Extension |
72℃ |
15 seconds / kb |
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Final Extension |
72℃ |
5 minutes |
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4-8℃ |
Hold |
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三、结果检测:反应结束后取 5µl 反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。