2× Taq plus PCR Master Mix(含染料)
目录号:71317
产品内容
产品成份 |
71317-05 |
71317-0100 |
2×Taq plus PCR Master Mix |
5x 1ml |
100x 1ml |
保存条件
-20℃保存,有效期 2 年。
经常使用,可置于 4 °C 保存,有效期 3 个月。
产品简介
本产品包含Taq plus DNA Polymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×。 适合大规模基因检测,以及高GC含量和复杂模板的扩增。
PCR产物3’端带A头,纯化后可直接用于TA载体克隆(Cat#42114-20)。
本产品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、测序等后续操作。
产品特点
1. 高产:产量是普通 Taq 酶的 2 倍!
2. 高效:延伸速度 5-10s/kb,一般 0.5 小时完成 PCR!
3. 高成功率:对于高 GC 模板和特殊结构的复杂模板有良好效果!
2 × Taq plus PCR Master Mix 使用说明:
一、配制 PCR 反应体系:(于冰上配制)
Component |
20μlReaction |
50 μlReaction |
FinalConcentration |
2× Taq plus PCR Mix |
10 μl |
25 μl |
1 × |
Forward Primer (10μM) |
0.4 μl |
1 μl |
0.2 μM |
Reverse Primer (10μM) |
0.4 μl |
1 μl |
0.2 μM |
Template DNA |
as required |
as required |
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ddH2O |
up to 20 μl |
up to 50 μl |
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参考模板用量(50 μl 反应体系):
质粒:0.1-10 ng;细菌基因组:10-100 ng;人类基因组:50-150 ng;cDNA:1-5 μl 。
二、建议 PCR 循环条件:
Step |
Temperature |
Time |
Cycle Number |
Initialdenaturation |
94℃ |
3 minutes |
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Denaturation |
94℃ |
10 seconds |
30-35 cycles |
Annealing |
55℃ |
15 seconds |
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Extension |
72℃ |
15 seconds / kb |
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Final Extension |
72℃ |
5 minutes |
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4-8℃ |
Hold |
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注意事项:
a. 片段≥3kb 或产量较低时,可以采用 20 秒/kb 的延伸速度或采用较多循环数。
b. 对于高 GC 含量或者有二级结构的模板,应该适当延长预变性时间到 5 分钟,变性
时间可以适当提高 5-10 秒。扩增效果不佳时,还可加入 DMSO 到终浓度 1-8%。