2× Taq PCR Master Mix For PAGE(含染料)
目录号:71510
产品内容
产品成份 |
710-05 |
710-0100 |
2× Taq PCR Master Mix For PAGE |
5× 1ml |
100× 1 ml |
保存条件
-20℃保存,有效期 2 年。经常使用,可置于 4 °C 保存,有效期 3 个月。
产品简介
本产品包含Taq DNA Polymerase for PAGE、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。特殊优化的酶和buffer系统,更适合短片段扩增和PAGE胶使用。
使用时只需加入模板、引物,并用ddH2O补足体积,使Taq Mix终浓度为1×即可进行反应。
本产品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、测序等后续操作。
适用范围:PAGE胶的较短片段扩增使用,扩增长度≤3kb。
注意事项:使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。
2 × Taq PCR Master Mix For PAGE 使用说明:
一、 配制 PCR 反应体系:(于冰上配制)
Component |
20 μl Reaction |
50 μl Reaction |
Final Concentration |
2× TaqPCRMixForPAGE |
10 μl |
25 μl |
1 × |
ForwardPrimer(10μM) |
0.4 μl |
1 μl |
0.2-0.4 μM |
ReversePrimer(10μM) |
0.4 μl |
1 μl |
0.2-0.4 μM |
Template DNA |
as required |
as required |
10pg-1μg |
ddH2O |
up to 20 μl |
up to 50 μl |
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参考模板用量(50 μl 反应体系):
质粒:0.1-10 ng;细菌基因组:10-100 ng;人类基因组:50-150 ng;cDNA:1-5 μl 。
二、 设置 PCR 循环条件:(请根据实际情况适当调整)
Step |
Temperature |
Time |
Cycle Number |
Initialdenaturation |
94℃ |
3 minutes |
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Denaturation |
94℃ |
30 seconds |
30-35 cycles |
Annealing |
55℃ |
30 seconds |
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Extension |
72℃ |
1-2 kb / minute |
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Final Extension |
72℃ |
5 minutes |
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4-8℃ |
Hold |
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三、结果检测:反应结束后取 5 µl 反应产物,直接上样电泳检测。