FlashPure Virus DNA/RNA Kit II

病毒基因组 DNA/RNA 快速提取试剂盒 II

目录号：91212

产品内容

自备试剂

无水乙醇

保存条件

Poly Carrier 置于-20℃保存，其他组分置于室温（15 ~ 25℃）保存。

产品简介

采用特异性结合病毒 DNA/RNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，病毒 DNA/RNA 提取试剂盒适合于从无细胞体液，包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒 DNA/RNA。

该产品可以满足绝大多数的病毒 RNA/DNA 的同时提取要求， 如病毒RNA：HCV（丙肝病毒），HIV（艾滋病毒），和 HTLV（人类嗜 T 淋巴细胞病毒）； 病毒 DNA：HBV（乙肝病毒）和 CMV（巨细胞病毒）等等。

病毒裂解后，DNA/RNA 后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜（特别配备了 Poly Carrier 可以从体系中轻松捕获微量核酸），再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒 DNA/RNA 从硅基质膜上洗脱。纯化后的病毒核酸无杂质和 PCR 抑制剂，可直接适用于 PCR/RT-qPCR 分析。

产品特点

1. 节省时间，简捷，单个样品操作一般可在 20 分钟内完成;

2. 应用广泛：可提取多种不同的液体样本。

注意事项

1. Poly Carrier：

如果起始处理量很少，我们推荐使用 Poly Carrier，如果预期有较大量核酸产量，用户可以根据需要选择是否加入 Poly Carrier。

2. Poly Carrier 的使用方法：在每个样品提取所需裂解液 VLB 中加入 4μl Poly Carrier 储存溶液， 将裂解液 VLB 与 Poly Carrier 溶液充分颠倒混匀即可(裂解液 VLB 容易起泡沫，请勿使用涡旋振荡混匀)。也可根据样品数量，在总共需要的裂解液 VLB 中加入总共需要的 Poly Carrier 混匀备用。混合液在室温 24 小时内稳定。

操作步骤（所有离心步骤均可在室温下进行，不影响提取效果。）

操作前，请先在漂洗液 RW 加入无水乙醇，加入体积详见标签。

1. 取 200 μl 血清等体液（需回复到室温，不足可用 0.9% NaCl 或者 PBS补足）转入1.5ml 离心管中，加入 400 μl 裂解液 VLB， 立刻涡旋振荡充分混匀。

（注意：如果处理样品量小或者病毒预期浓度较低，建议在 400 μl 裂解液 VLB 中加入4μl Poly Carrier 储存溶液。）

2. 室温 (15-25℃) 放置 10 分钟，每隔 5 分钟，振荡混匀一次。

3. 加入 450 μl 无水乙醇，立刻涡旋振荡充分混匀。

（注意：如果周围环境高于 25℃，乙醇需要冰上预冷后再加入。）

4. 每次转移≤750 μl 上清混合液（包括沉淀）至 RNA 吸附柱中（吸附柱

放入收集管中），12,000 rpm 离心 1 min，倒弃滤液，此时，RNA 被

吸附在膜上。重复此过程，直到溶液全部上柱。

5. 加入500μl去蛋白液RE，12,000 rpm 离心 30 sec，倒弃滤液。

6. 加入500μl漂洗液RW，12,000 rpm 离心 30 sec，倒弃滤液。

（注意：漂洗液 RW 中按要求加入无水乙醇，用后立即盖紧瓶盖，以防乙醇挥发。）

7. 重复步骤6一次。

8. 将RNA吸附柱放回空收集管中，12,000 rpm 离心 2 min，甩干膜上残留的乙醇。

9. 取出离心吸附柱，放入一个新的 RNase-Free1.5 ml 离心管中，在吸附膜的中央悬空滴加 30 ~ 50 μl 的 RNase-Free ddH2O 洗脱，室温放置1 min。12,000 rpm 离心 1 min，管底即 RNA 溶液。

（注意：如要要提高 RNA 浓度，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，室温放置1 min，再次离心收集）

10. 病毒DNA可以存放在 2-8℃，如果要长时间存放，请置于-20℃。病毒RNA建议最好立刻使用，否则立刻短期置于-70℃备用。

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